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海藻糖是昆虫血淋巴中最主要的糖类,在调控昆虫生殖、生长发育和能量代谢中发挥着重要的作用。菜蛾盘绒茧蜂C.vestalis寄生小菜蛾P.xylostella 后,寄主免疫能力下降,营养代谢紊乱,另外一个显著的变化就是血淋巴中糖含量的改变。所以,本文就菜蛾盘绒茧蜂调控寄主海藻糖的糖代谢及其相关分子机制展开研究。首先检测了菜蛾盘绒茧蜂寄生对小菜蛾血淋巴中海藻糖和葡萄糖含量的影响。然后克隆了小菜蛾海藻糖代谢通路上的6个酶的基因序列,通过定量PCR及RNAi发现了是通过升高合成关键基因的转录水平造成寄主寄生后海藻糖含量升高,酶活检测表明寄生并没有改变寄主海藻糖酶酶活。最后,用假寄生、显微注射寄生因子等试验证明了寄生早期的海藻糖含量升高是由于毒液发挥作用,且毒液通过提升PxHK的转录水平,从而发挥作用。现将研究结果总结如下:1.以3龄中(3rd-Ⅱ)为菜蛾盘绒茧蜂寄生的起始点,按发育阶段序列检测了寄生后,寄主发育至3龄末(3rd-Ⅲ)、4龄初(4th-Ⅰ)、4龄中(4th-Ⅱ)、4龄末(4th-Ⅲ)时,小菜蛾体内血淋巴中海藻糖及葡萄糖含量变化情况。结果表明当寄生后寄主发育至3龄末时,和未寄生的寄主体内血淋巴中海藻糖含量相比,显著升高,而后一直升高。葡萄糖含量在3龄末及4龄末时显著升高,其余龄期无变化。2.基于小菜蛾基因组及转录组数据,克隆获得了小菜蛾海藻糖代谢通路上的6个酶的基因序列,其中包括4个合成酶基因(糖原磷酸化酶PxGP、磷酸葡糖变位酶PxPGM、已糖激酶PxHK、海藻糖-6-磷酸合成酶PxTPS)、1个海藻糖转运蛋白PxTRET1,和1个分解酶基因PxTRE-2,并由此设计定量PCR引物,检测菜蛾盘绒茧蜂寄生对寄主小菜蛾糖代谢相关基因转录水平的影响。结果表明:寄生后寄主发育至3龄末时,PxHK的转录水平较对照相比上升;寄生后寄主发育至4龄初时,PxTRET1的转录水平较对照相比下降,但PxGP的转录水平与对照相比下降;寄生后寄主发育至4龄中时,PxGP、PxTPS、PxHK的转录水平较对照相比均上升;寄生后寄主发育至4龄末时,PxGP、PxTPS、PxHK的转录水平较对照相比也上升,但PxTRET1的转录下降。PxTRE-2在寄生后寄主发育的各个龄期里均无变化。此外,通过比较寄生前后对寄主小菜蛾体内海藻糖酶酶活的变化,发现菜蛾盘绒茧蜂寄生并不改变小菜蛾海藻糖酶酶活。3.以小菜蛾PxTPS为研究对象,研究RNAi的干扰效果以及干扰后的小菜蛾血淋巴中海藻糖含量的变化。以寄生后小菜蛾的3龄末为起点进行显微注射500ngdsPxTPS,待小菜蛾发育至4龄中时进行PxTPS转录水平的检测,发现处理组PxTPS转录水平显著低于对照组,由此说明干扰效果良好,同时对此时处理组及对照组小菜蛾血淋巴中海藻糖含量进行测定,结果表明也显著低于对照组,表明RNAi降低PXTPS的转录水平可引起寄生后寄主血淋巴中海藻糖含量下降,反之也说明菜蛾盘绒茧蜂寄生引起的PxTPS转录水平上升是寄生后小菜蛾血淋巴中海藻糖含量升高的原因之一。4.为了分别确定菜蛾盘绒茧蜂携带的寄生因子对寄主小菜蛾血淋巴中海藻糖含量的影响,本论文采用了假寄生(去除畸形细胞)、显微注射(CvBV和毒液)的方法,结果表明:假寄生(去除畸形细胞)可引起寄生早期3龄末及4龄初时小菜蛾血淋巴中海藻糖含量上升,但不能引起寄生后期小菜蛾血淋巴中海藻糖含量的变化;进一步通过分别注射CvBV及毒液则表明寄生早期寄主体内血淋巴中海藻糖含量升高与毒液相关,而与CvBV无关。最后,qPCR检测结果表明,在寄生早期,菜蛾盘绒茧蜂毒液上调海藻糖合成通路上的PxHK转录水平由此上调了血淋巴中海藻糖含量。