(Y0.95Eu0.05)2O3稀土荧光材料的生物相容性评价

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随着纳米材料学和生物医学等现代科学技术的蓬勃发展,荧光纳米材料的设计、制备、修饰及其在生物医学领域中的应用正逐渐成为研究热点。与传统的荧光标记材料如有机荧光染料等相比,荧光纳米材料的物理化学性质更具有可调性且更加多样化,具有较为灵活的尺寸、形貌、表面结构,荧光性质好而且易于对材料进行功能化修饰。本文对课题组研究的(Y0.95Eu0.05)2O3稀土荧光材料进行了生物相容性评价,探讨其作为荧光标记材料的可能性。本论文首先探讨了提取和纯化原代大鼠血管平滑肌细胞的方法,通过采用组织贴壁法提取细胞,获得了数量较多、活性较高的细胞,表明组织贴壁法是一种比较好的提取细胞的方法,能够为实验提供可靠的细胞来源。通过对血管平滑肌细胞中特异性的α-SM Actin进行免疫荧光鉴定,表明所分离的细胞为血管平滑肌细胞,且纯度在90%以上。采用MTT法检测细胞的增殖情况并绘制生长曲线,结果表明在第4~6天的细胞增殖活性最高,可以取该阶段的细胞用于实验。将培养至第三代的血管平滑肌细胞与氨基化前后的不同浓度的(Y0.95Eu0.05)2O3稀土荧光材料一起培养,观察细胞的形态变化,采用CCK-8法检测材料的细胞毒性。通过Hoechst33342和PI染色后在荧光显微镜下观察细胞情况,将材料和细胞共培养后用流式细胞仪检测细胞凋亡,并用荧光显微镜观察材料的细胞成像。结果表明,氨基化前后的材料细胞毒性等级均为一级,且氨基化之后的材料具有更好的生物相容性。细胞成像的结果表明,材料的荧光强度高且稳定性好,预示着其作为荧光探针在生物成像中有较大的应用前景。将材料和血液直接接触并相互作用,分别于不同的时间段检测材料的抗凝血性BCI,即溶液中血红蛋白的吸光度值,以检测血液中的凝血因子被激活的程度。结果表明,随着时间的延长,材料表现出一定的抗凝血性能,且氨基化之前的材料抗凝血性更好。将血液与材料直接接触后检测材料的溶血率,结果显示,氨基化前后的材料溶血率均比较低,分别为0.18%和0.72%,符合国家标准对生物材料的溶血率要求。
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