近年来,随着小麦温光发育分子生物学研究的不断深入,已经有多个小麦温光发育基因被发掘,但还不能诠释小麦温光发育的品种类型。本文基于小麦春化发育基因表达谱,筛选出春化表达差异基因Wcor18,对其进行了基因克隆、序列分析、过表达载体构建、遗传转化及功能分析。同时,对实验室前期筛选的光周期相关基因Ta Ub27的高代过表达植株进行了功能分析,并对该基因进行了抗逆胁迫实验。结果如下:1、Wcor18基因的ORF为498bp,编码165个氨基酸,其中含有23个酸性氨基酸(asp+glu)残基和14个碱性氨基酸(arg+lys)残基,其理论PI为4.93。Wcor18蛋白为亲水性蛋白,不稳定指数为44.64,属于不稳定蛋白,易水解氧化。2、对Wcor18基因进行半定量PCR及荧光定量PCR分析,结果显示该基因在低温环境下表达量上调。在验证Wcor18基因低温诱导表达量上调的基础上,克隆转化了Wcor18基因,获得了京841小麦过表达的转基因后代。观察发现转基因后代的幼穗发育加快,提前通过二棱期,完成春化发育,表明Wcor18基因有加快小麦春化发育进程的作用。在4℃低温,20%PEG6000,ABA,Na Cl等4种逆境条件下,用荧光定量PCR确定Wcor18基因的表达量均升高,对逆境胁迫迅速应答,表明Wcor18基因参与了逆境胁迫过程。3、研究Ta Ub27基因对光周期反应发现,光照条件下Ta Ub27的表达量较高,黑暗条件下表达量降低。品种对日长反应有差异,辽春10号Ta Ub27表达量受日长影响较小,即长光和短光条件下,受光照条件诱导Ta Ub27表达量都高量表达;而宁春36受日长影响较大,长日下光照条件诱导Ta Ub27高量表达,短日下光照诱导表达作用不明显。4、观察光周期候选基因Ta Ub27的过表达转基因小麦发现,转Ta Ub27基因株系比对照的抽穗、孕穗期和成熟期都提前,说明该基因在小麦光周期发育阶段促进了小麦发育进程,推测Ta Ub27基因对小麦的光周期发育过程起促进作用。分析Ta Ub27的组织特异性表达发现,该基因在叶片的表达量最高,在根和穗中基本无表达,与小麦光周期反应器官相吻合。5、在Na Cl,20%PEG6000,ABA,4℃等4种逆境条件下,用荧光定量PCR测定Ta Ub27基因的表达量变化发现,Ta Ub27基因表达量随着处理时间缓慢增加,并在24h时达到最高。进一步分析转基因过表达植株在高盐条件下对发芽率的影响,发现该基因过表达植株在高盐情况下发芽率比对照显著升高,推测Ta Ub27基因对小麦抗逆境胁迫有一定作用。