LPSp对HBV宫内感染者脐血单个核细胞分泌IL-4、IFN-γ及TLR4表达的影响

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目的:研究不同浓度LPSp对HBV宫内感染孕妇的脐血单个核细胞分泌IL-4、IFN-γ及细胞表面TLR4表达的影响,为HBV宫内感染免疫治疗寻找新的切入点提供理论依据。方法:选择外周血乙肝标志物(HBVM)检测(?)HBsAg、HBeAg均为阳性且肝功能正常的孕妇71例。脐血HBV-DNA阳性为宫内感染组,共25例,脐血HBV-DNA月性为宫内未感染组,共46例。于分娩时取脐血,肝素抗凝,用Ficoll密度离心法分离出CBMC并培养24小时,收集培养上清液及细胞,宫内感染组根据加入LPSp刺激浓度的不同分为:无LPSp组、LPSp1μg/L组、LPSp10μg/L组、LPSp100μg/L组;选择同期分娩的乙肝两对半正常且肝功能正常的孕妇20例为对照组。采用双抗体夹心法(ELISA)检测培养上清液中的IFN-γ、IL-4的浓度,用流式细胞仪检测(?)CBMC表面TLR4表达。结果:(1)宫内感染组CBMC细胞培养上清液中IFN-y水平低于宫内未感染组及对照组(P<0.01),IL-4水平则高于宫内未感染组及对照组(P<0.01)。而宫内未感染组与对照组相比,IFN-γ、IL-4水平差异均无显著性(P>0.05)。(2)宫内感染组中,LPSp各组IFN-γ、IL-4水平与无LPSp组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)各组IFN-y水平与LPSp浓度呈正相关(r=0.778),IL-4水平与LPSp浓度呈负相关(r=-0.927)。(4)各组TLR4表达与IFN-y水平呈正相关(P<0.05),TLR4与IL-4呈负相关(P<0.05);TLR4表达水平与LPSp浓度呈正相关(r=0.754)。结论:CBMC的TLR4是LPSp引起免疫应答的受体,LPSp可诱导CBMC的TLR4的表达上调。LPSp可以调节CBMC分泌Th1/Th2型细胞因子,呈剂量依赖性,高剂量LPSp可使IFN-y分泌增多,而低剂量LPSp可使IL-4分泌增多。因此,不同浓度的LPSp可能通过影响TLR4信号传导通路诱导CBMC分泌不同细胞因子,选择性调控Th1/Th2型应答。
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