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目的:探讨体外培育牛黄对Ⅱ型肺泡上皮细胞的保护作用,从而揭示体外培育牛黄对COPD的作用机理,并为体外培育牛黄联合激素治疗慢性阻塞性肺疾病提供理论依据。方法:将50只雄性SD大鼠按随机数字表进行随机分组:空白对照组(A),COPD模型组(B)、牛黄干预组(C)、布地奈德干预组(D)、牛黄+布地奈德干预组(E)。COPD模型组(B组):第1天和第15天在SD大鼠气道内注入0.1ml脂多糖溶液,第2~28天(第15天除外)关在自制熏烟箱内被动吸烟2次,30min*12支烟/次,中间间隔2小时呼吸正常空气。空白对照组(A组):第1天及第15天在大鼠气道内注入0.1ml生理盐水。牛黄干预组(C组):在每次烟熏前1小时给予体外培育牛黄灌胃(800mg/kg);激素干预组(D组):在每次烟熏前1小时给予雾化吸入布地奈德(1mg/d)。牛黄+激素干预组(E组):在每次烟熏前1小时给予体外培育牛黄灌胃(800mg/kg)和雾化吸入布地奈德(1mg/d)。4周后用10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠,行肺功能检查,观察血清中SAA含量变化、肺组织病理改变,利用免疫组化测定Caspase-3的表达及TUNEL技术检测Ⅱ型肺泡细胞的凋亡。结果:1.肺组织病理切片提示造模均成功;2.肺功能测定:与A组相比,B组大鼠FEV0.3/FVC(%)均降低,气道阻力(RI)增高,差异有统计学意义(P<0.05),证明模型组符合COPD肺功能改变;5组大鼠肺功能FEV0.3/FVC、RI多重比较差别均有统计学意义(P<0.05);5组大鼠的FEV0.3/FVC由高到低依次是A>E>D>C>B,气道阻力(RI)由高到低依次示B>C>D>E>A;3.SAA测定:与正常对照组比较,COPD模型组的SAA显著升高,差异有统计学差异(P<0.05);5组大鼠血清中的SAA含量多重比较,除C组和D组尚不能认为有统计学意义外(P>0.05),其余各组比较组间差别有统计学意义(P<0.05);大鼠血清中的SAA含量由高到低是:B>(C或D)>E>A;4.染色后的切片Caspase-3阳性蛋白在普通显微镜下观察呈棕黄色或黄褐色。与A组比较,COPD模型组的肺组织灰度值明显降低,差异有统计学差异(P<0.05);5组大鼠灰度值灰度值多重比较均有统计学意义(P<0.05);灰度值由高到低依次是A>E>D>C>B,即Caspase-3在各组中的表达由高到低为B>C>D>E>A;5.Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡指数:TUNEL染色显示细胞核内含有棕黄色颗粒者为TUNEL阳性细胞。与正常对照组比较,COPD模型组的Ⅱ型肺泡上皮细胞的凋亡指数显著升高,差异有统计学差异(P<0.05);5组大鼠的凋亡指数多重比较均有统计学意义(P<0.05);5组大鼠凋亡指数由高到低依次是B>C>D>E>A。结论:(1)熏烟叠加气管内滴注脂多糖法复制COPD模型,成功率高,能基本模拟COPD的病理改变。(2)体外培育牛黄具有抗炎作用,可以使大鼠外周血SAA水平明显降低。(3)COPD大鼠模型发生了Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡,体外培育牛黄和吸入糖皮质激素可以降低模型组大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡,并且两者联合应用更能降低Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡,延缓COPD的进行性发展。