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目的:本研究将异莲心碱、甲基莲心碱、莲心碱的体外抗氧化能力进行比较,选出能力较强的单体作为待测药物,作用于人膀胱癌T24细胞与人肝癌Hep G2细胞,观察其对两种癌细胞增殖率的影响,选取增殖抑制率较高的癌细胞,测定待测药物对其形态、周期、凋亡率、迁移、侵袭的影响,并探讨待测药物诱导癌细胞凋亡的潜在分子机制,为其药理作用的开发提供理论依据。方法:采用羟基自由基(·OH)清除、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、总还原能力、总抗氧化能力共5种方法评价异莲心碱、甲基莲心碱、莲心碱的体外抗氧化能力;采用CCK-8法分别比较24 h、48 h、72 h下不同浓度的异莲心碱对T24细胞和Hep G2细胞增殖的影响,以确定癌细胞、给药剂量、给药时间;Hoechst33258染色观察异莲心碱诱导T24细胞凋亡后细胞核形态的变化;采取流式细胞术分别测定24 h下不同浓度异莲心碱对T24细胞周期分布和细胞凋亡率的影响;用细胞小室(Transwell)观察异莲心碱对T24细胞迁移与侵袭的影响;蛋白免疫印记法(Western blot)检测异莲心碱诱导T24细胞后相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、MMP-2、MMP9、P65、P-P65、Ikk?、IκB?、?-Actin的表达量,免疫荧光法检测NF-κB活性亚基P65核转位情况。结果:异莲心碱、甲基莲心碱、莲心碱均具有较强的清除自由基能力,以异莲心碱能力最强。异莲心碱具有显著抑制T24细胞和Hep G2细胞增殖的作用,且异莲心碱对T24细胞增殖的抑制作用更强。流式结果显示,异莲心碱诱导T24细胞阻滞于G0/G1期和S期,并以剂量依赖性使T24细胞发生凋亡。Hoechst33258结果表明,异莲心碱作用T24细胞后,细胞数量减少,形态皱缩或改变,蓝色荧光加深。Western bolt检测结果显示,异莲心碱下调了P-P65、P-IκB?蛋白表达水平,上调了P65、IκB?蛋白的表达水平。异莲心碱能抑制P65从细胞质向细胞核转移。结论:异莲心碱可清除体内过多的自由基,抑制脂质过氧化,降低因过氧化产物产生的癌变或突变。异莲心碱亦可减弱T24细胞的迁移与侵袭能力,可能与下调MMP-2、MMP-9蛋白的表达相关。此外,异莲心碱明显抑制T24细胞增殖,诱导其凋亡,作用机制可能与抑制NF-κB信号通路活性相关。