甘草次酸和齐墩果酸作为临床保肝方面广泛应用的药物,存在肝脏首过效应严重,体内半衰期较短的缺点。前期工作中,中国海洋大学医药学院江涛教授课题组对其进行结构修饰合成了顺式-3-O-[4-(R)-(3-氯苯基)-2-氧代-1,3,2-二氧磷杂环己基]-18β-甘草次酸(GA16R)和顺式-3-O-[4-(S)-(3-氯苯基)-2-氧代-1,3,2-二氧磷杂环己基]-18β-甘草次酸(GA16S)两种甘草次酸酸磷脂衍生物；以及顺式-3-O-[4-(R)-(3-氯苯基)-2-氧代-1,3,2-二氧磷杂环己基]-18β-齐墩果酸(OA 17R)和顺式-3-O-[4-(S)-(3-氯苯基)-2-氧代-1,3,2-二氧磷杂环己基]-18β-齐墩果酸(OA17S)两种齐墩果酸酸环磷脂衍生物。本文将对上述四种修饰药物进行肝损伤药效学的初步评价,对其代谢机制和体外代谢情况进行探讨,并对其体内过程进行研究,从而给出上述四种修饰物成药性的初步评价结果。一、四种18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物对CCl4致小鼠肝损伤的药效学研究利用CCl4肝损伤模型对18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物的药效学进行研究,造模成功后发现四种修饰物均能明显降低小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)活力的升高；明显降低肝组织中丙二醛(MDA)的含量,显著提高肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,减轻肝组织的病变情况。R构型和S构型并无明显差异。表明四种18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物均具有一定程度的保肝药理作用。二、四种18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物的体外代谢研究采用大鼠肝微粒体孵育法对四种18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物进行体外代谢研究,结果显示四种修饰物体外代谢过程中均释放出单磷酸酯和原型药物,其体外代谢趋势相同,体外代谢较快,浓度随时间增加逐渐减小,30min内修饰物基本代谢完全。R构型比S构型释放完全。修饰物释放出的单磷酸酯和原型药物随时间增加达到最高浓度后逐渐减少,30min后未检测到。推测两类修饰物的体外代谢机制为在肝微粒体作用下首先代谢成单磷酸酯,然后进一步水解代谢成为原型药物,从而发挥药效作用。三、两种18β-甘草次酸修饰物的体内药代动力学研究1.建立了测定大鼠血浆样品、组织样品和尿粪样品中两种18β-甘草次酸修饰物及原型药物的分析方法,并对定量分析方法进行了验证。2.大鼠腹腔给药和尾静脉给药后的血药浓度—时间曲线采用药动软件计算得到药代动力学参数,两种18β-甘草次酸修饰物及其释放的原型药物均符合二室模型。两种18β-甘草次酸修饰物及其释放的原型药物在体内存在的时间较长,S构型长于R构型,达48h。腹腔和尾静脉给予修饰物要比直接给予原型药物的药代动力学参数理想,半衰期明显增加,能明显改善原型药物在临床应用上的缺陷,S构型较R构型理想。但原型药物的血药浓度明显低于修饰物的浓度。3.大鼠尾静脉给药后两种18β-甘草次酸修饰物及其释放的原型药物在大鼠心,肝,脾,肺,肾和脑中均有分布,其中以肝脏浓度最高,明显高于其它主要组织,并且高于血液中的药物浓度,存在时间较长,R构型和S构型并无明显差异。随着时间的增加并未出现组织蓄积毒性的情况。提示两类修饰物具有肝靶向的效果,为临床治疗肝病的用药提供了重要参考。4.排泄结果显示,大鼠尾静脉给药后两种18β-甘草次酸修饰物主要以药物原型通过粪便排出体外,尿液中也有部分排出。R构型和S构型并无明显差异。修饰物释放的原型药物通过尿和粪排泄的量很少,推测因其自身代谢原因所致。四、两种齐墩果酸修饰物的体内药代动力学研究1.建立了两种齐墩果酸修饰物及原型药物在大鼠血浆样品、组织样品和尿粪样品中的测定方法,并对定量分析方法进行了验证。2.两种齐墩果酸修饰物通过大鼠腹腔和尾静脉给药后的血药浓度—时间曲线采用药动软件计算得到药代动力学参数,两种修饰物及其释放的原型药物均符合二室模型。两种齐墩果酸修饰物及其释放的原型药物在体内存在的时间较长,R构型和S构型并无明显差异。腹腔和尾静脉给予修饰物要比直接给予原型药物的药代动力学参数理想,半衰期明显增加,能明显改善原型药物在临床应用上的缺陷。但原型药物的血药浓度明显低于修饰物的浓度。3.两种齐墩果酸修饰物大鼠尾静脉给药后,两种修饰物及其释放的原型药物在大鼠心,肝,脾,肺,肾和脑中均有分布,其中以肝脏浓度最高,明显高于其它主要组织,并且高于血液中的药物浓度,存在时间较长。R构型和S构型并无明显差异。随着时间的增加并未出现组织蓄积毒性的情况。提示两类修饰物具有肝靶向的效果,为临床治疗肝病的用药提供了重要参考。4.排泄结果显示,大鼠尾静脉给药后两种齐墩果酸修饰物主要以药物原型通过粪便排出体外,尿液中也有部分排出。R构型和S构型并无明显差异。修饰物释放的原型药物通过尿和粪排泄的量很少,推测因其自身代谢原因所致。结论药效学和药代动力学的初步评价结果显示,四种18β-甘草次酸和齐墩果酸均能起到减轻CCl4致小鼠肝损伤的程度,能够明显提高原型药物的半衰期,防止代谢过快,并达到肝脏靶向的效果。结果显示出四种修饰物均具有成药的可能性,最终的成药性结果还需要通过全面深入的评价工作进行验证。