广西猪瘟流行毒株生长特性的初步研究

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本实验采用RT-PCR技术对本实验室保存的8份广西各地的猪瘟病猪的脾脏和淋巴结进行诊断,检出其中3份为CSF阳性,分别来自广西梧州、博白和北海地区。以这3株猪瘟野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒为材料,研究其在宿主体内和体外PK—15细胞中增殖的基本特性和差异。 本实验中,3株猪瘟野毒和石门株病毒在宿主体内增殖时,CSFV石门株和梧州株引起猪体发病的体温变化、临床症状和病理变化相似,都为“典型”猪瘟。病猪体温呈稽留热,高达41℃,病理变化较典型。CSFV博白株和北海株在动物实验中引起猪只发病的临床症状为“非典型”,病猪体温呈张驰热,在体温上升至40.5℃后恢复正常,而后又上升。病猪病程长,病理变化典型。 本实验用间接免疫荧光和免疫酶检测PK—15细胞中的猪瘟病毒抗原,发现其主要存在于细胞的核膜以及内质网和高尔基体富集的区域。用免疫酶试验测定各CSFV毒株的TCID50,以各CSFV毒株的200 TCID50的量接种PK—15细胞,在12h、24h、36h、48h、60h、72h和96h分别收获上清中的病毒和与细胞结合的病毒,并测定病毒滴度,绘制病毒生长曲线,从而研究各CSFV毒株在体外PK—15细胞的生长特性。其中CSFV博白株和CSFV疫苗株在60h和72h时释放到上清中的病毒粒子达到最高峰,为107.3/ml和107/ml;CSFV石门株和CSFV梧州株次之,为106.3/ml和105.8/ml;CSFV北海株最低,只有105/ml。在与细胞结合病毒的增殖过程中,各CSFV毒株增殖的滴度差别不大,从12h开始呈直线上升,最后都达106/ml左右。 从本实验对广西3株野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒在宿主体内和体外PK—15细胞中增殖的比较来看,广西的一部分毒株很可能在毒力和生长特性上已经发生了一些变异。
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