本文以高丛越橘‘日出’、半高丛越橘‘北陆’和矮丛越橘‘芬蒂’3个品种组培苗叶片和愈伤组织为试材研究了酶液组成、酶解时间、酶液pH值、渗透压调节剂、材料生理状态、预处理方法及基因型以及愈伤组织的继代培养天数和继代次数对其原生质体分离效果的影响和离心速度和离心时间对原生质体收集纯化的影响。以期筛选出越橘原生质体分离纯化的最佳条件。试验主要结果如下： 1 越橘组培苗叶片和愈伤组织原生质体分离的基本条件相同，即酶液组成为1.5％纤维素酶+1.5％离析酶+0.7mol/L甘露醇+5mmol/LMES，酶解时间是15hr，酶液pH值为6.5。 2 不同材料类型，原生质体分离效果不同。离体组培苗叶片与其诱导产生的愈伤组织相比，前者原生质体分离效果更好，活原生质体产量为2.07×10~5个/g Fw，而愈伤组织仅为1.57×10~5个/g FW。采用愈伤组织作为原生质体分离材料时，继代培养第14d的愈伤组织比培养7d，21d，28d的愈伤组织分离效果好，原生质体产量和活力分别为1.57×10~5个/g FW和79.64％。继代3次的愈伤组织比继代1次，2次和4次的愈伤组织得到的活原生质体多。 3 顶端第1-3片叶原生质体分离效果远远好于第4-5片叶，活原生质体产量分别为2.07×10~5个/g FW和0.77×10~5个/g FW。 4 4℃冷处理或3hr暗处理两种预处理方法都能在一定程度上提高原生质体产量和活力，但与对照相比差异不大。 5 不同基因型间原生质体分离效果不同，‘北陆’活原生质体产量高于‘日出’和‘芬蒂’。 6 越橘原生质体收集纯化的离心适宜条件为800r/min转速下离心7min，能收集到大量有活力的原生质体。 7 对酶解前后酶液pH值测定发现，酶解后酶液pH值均下降，但下降幅度不同。 8 甘露醇比蔗糖更适宜作越橘原生质体分离的渗透压调节剂。甘露醇适宜浓度为0.7mol/L。