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目的:研究慢性硬膜下血肿(CSDH)外膜及硬脑膜中水通道蛋白4(AQP4)和水通道蛋白9(AQP9)的表达,探讨两者的异常表达与CSDH发生发展及临床特征的关系。方法:25例CSDH患者均经头颅CT或MRI确诊,手术中,严格无菌无酶操作,采集患者的硬脑膜及血肿外膜。血肿外膜为实验组,硬脑膜为对照组,利用免疫组织化学S-P法和蛋白质印迹法(Western blot)对硬脑膜及血肿外膜中AQP4、AQP9的含量进行测定。将检测结果换算成AQP4、AQP9的结果,实验数据分类汇总后,采用SPSS18.0软件对数据进行统计。结果:1、免疫组化结果显示AQP4、AQP9主要表达于细胞膜上和胞质内,AQP4、AQP9在血肿外膜中表达的阳性率分别为76%(19/25)、80%(20/25),在硬脑膜中表达的阳性率分别为16%(4/25)、24%(6/25),在血肿外膜中的表达明显高于硬脑膜,有显著性差异(χ2=18.116, P=0.000<0.05; χ2=15.705,P=0.000<0.05)。2、Western blot检测结果显示AQP4、AQP9在血肿外膜中的表达量分别为0.556±0.069ng/ml、0.566±0.088ng/ml,在硬脑膜中的表达量分别为0.171±0.059ng/ml、0.188±0.056ng/ml。血肿外膜中的表达明显高于硬脑膜,有显著性差异(AQP4:t=6.664, P<0.05;AQP9:t=3.294,P<0.05)。3、在血肿外膜中,AQP4、AQP9的表达成正相关(Spearman相关系数r=0.499,P=0.012<0.05)。4、AQP4、AQP9在血肿外膜中的表达与患者的年龄、性别、有无外伤史、单双侧血肿等临床特征均无显著性差异(P>0.05)。结论:1、AQP4、AQP9在CSDH的发生发展中可能起促进作用。2、AQP4、AQP9在CSDH中的表达与患者年龄、性别、有无外伤史、单双侧血肿临床特征无明显相关性。3、AQP4、AQP9在血肿外膜中的表达呈正相关,推测两者在CSDH的发生发展中可能具有协同作用。