冻绿果实黄酮提纯及其对CCl4致小鼠急性肝损伤保护作用研究

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冻绿(Rhamnus utilis),鼠李科鼠李属,在我国多生于南北地区一种灌木或小乔木。冻绿果实在民间可入药,有解热,解酒,治泻,保肝等功效。目前,由于缺乏理论基础,其重要的药用价值基本未被开发利用。本研究以冻绿果实和叶片为材料,探究其含有的大致化学成分;超声提取冻绿果实含有的黄酮类化合物,通过响应面法优化并确定大孔树脂法分离纯化工艺;以ICR小鼠为试验对象,探索冻绿果实黄酮对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用,以期为治疗或预防急性肝损伤开发新药物资源提供理论基础。主要研究内容及结果如下:1.对冻绿果实和叶片的化学成分进行了初步探索。对冻绿果实进行水、乙醇和石油醚的提取,通过颜色变化,及是否产生沉淀等化学变化来初步判断,得出冻绿果实和叶片中均含有多糖、有机酸、酚类、鞣质、黄酮、甾体、三萜类、挥发油,均可能含有蒽醌类、强心苷类。冻绿果实中含有香豆素、内酯类、油脂,而叶片不含这几类物质。2.从6种型号不同的大孔树脂中,通过静态吸附解吸筛选出效果最理想的大孔树脂型号。通过动态吸附洗脱单因素试验初步确定纯化相关各因素的较优水平,然后结合响应面法优化确定大孔树脂分离冻绿果实黄酮的纯化工艺条件为:上样液pH3、浓度0.3 mg/mL、流速4 mL/min、体积2 BV;洗脱液浓度80%、流速4.5 mL/min、体积4BV。冻绿果实黄酮吸附率(85.6±0.30)%,解吸率(71.26±0.28)%,回收率为(94.23±0.40)%。3.通过ICR小鼠建立CCl4急性肝损伤模型,探索冻绿果实黄酮对CCl4致小鼠急性肝损伤的作用。结果显示,冻绿果实黄酮达到一定剂量时,可显著降低与肝损伤相关的指如标ALT、AST及MDA的含量,可显著提高SOD、CAT的含量。表明冻绿果实黄酮浓度达到一定剂量时,可以有效改善CCl4致小鼠急性肝损伤情况。
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