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确立高效、灵敏的手性分离分析方法是药物分析领域的重要任务。药物的对映体之间在药动学上通常会存在显著的差异。因此,创建一种精准的手性化合物分离方法对于探索手性药物不同对映体的空间立体选择性行为颇为重要。该方法具有一定的实际意义。本实验的主要内容即应用到高效液相色谱法的手性固定相法分离了氧氟沙星和氟甲喹两种手性药物对映体；并检测了氧氟沙星和氟甲喹在真鲷鱼体内的空间立体选择性行为及体内构型的转化情况。1.氧氟沙星对映体分离方法研究建立了以CHIRALCEL OD-H手性柱作为手性固定相拆分氧氟沙星对映体的方法。分别考察了有机改性剂的类型和比例、流速和柱温等方面对于氧氟沙星对映体分离的影响。确定了氧氟沙星对映体最佳的拆分条件：采用高效液相色谱法对氧氟沙星进行拆分的最佳条件为流动相组成V正己烷：V乙醇=60：40,流速为0.6ml/min,柱温为20℃,流动相中加入0.1%的乙酸,检测波长为294nm。左氧氟沙星和右氧氟沙星的检出限分别为0.02μg/g和0.03μg/g,定量限分别为0.04μg/g和0.05μg/g。左氧氟沙星平均回收率为83.46%。日间精密度和日内精密度的RSD分别为0.34%和0.44%。右氧氟沙星平均回收率为87.32。日间精密度和日内精密度的RSD分别为0.46%和0.69%。2.氧氟沙星在真鲷鱼体内的选择性药物动力学的研究真鲷鱼经灌胃给予氧氟沙星后,S-(-)-OFLX与R-(+)-OFLX的药物动力学参数：t1/2分别为11.6h和12.3h；Ke分别为0.42和0.64；Tpeak皆为6h;Cmax分别为7.33mg/L和8.73mg/L；AUC分别为16.28Mg/L·h和20.50Mg/L·h。其血浆中R-(+)-OFLX的浓度始终比S-(-)-OFLX高，S-(-)-OFLX与R-(+)-OFLX的Cmax比值为0.8,AUC比值为0.7,S-(-)-OFLX与R-(+)-OFLX的Cmax和AUC都具有显著性的差异(p<0.05),此结论表明氧氟沙星在真鲷鱼体内的药物代谢动力学具有一定的立体选择性。3.氟甲喹对映体分离方法研究建立了以CHIRALCEL OD-H手性柱作为手性固定相拆分氟甲喹对映体的方法。分别考察了有机改性剂的类型、比例、流速和柱温等对氟甲喹分离的影响。采用高效液相色谱法对氟甲喹进行拆分的最佳条件：流动相为100%乙醇,流速为0.5ml/min,柱温为20℃,流动相中加入0.3%三乙胺,检测波长为254nm。S-(-)-FMQ和R-(+)-FMQ的检出限分别为0.05μg/g和0.04gg/g,定量限分别为为0.08μg/g和0.07μg/g。S-(-)-FMQ平均回收率为85.33%。日间精密度和日内精密度的RSD分别为0.45%和0.51%。R-(+)-FMQ平均回收率为83.28%。日间精密度和日内精密度的RSD分别为0.54%和0.47%。4.氟甲喹在真鲷鱼体内的选择性药物动力学的研究建立了简便的手性固定相法拆分氟甲喹对映体,并定量测定真鲷鱼体内氟甲喹两对映体。得出结论：真鲷鱼经灌胃给予氟甲喹后,S-(-)-FMQ与R-(+)-FMQ的药物动力学参数：t1/2分别为12.4h和11.2h;Ke分别为0.48和0.62；Tpeak皆为8h；Cmax分别为7.64mg/L和3.39mg/L；AUC分别为42.26Mg/L·h和18.68Mg/L·h。其血浆中S-(+)-FMQ的浓度始终比R-(-)-FMQ高，S-(-)-FMQ与R-(+)-FMQ的Cmax比值为2.25,AUC比值为2.26,S-(-)-FMQ与R-(+)-FMQ的Cmax和AUC都具有显著性的差异(p<0.05),此结论表明氟甲喹在真鲷鱼体内的药物代谢动力学具有一定的立体选择性。