子宫内膜炎母猪子宫内细菌分离和鉴定

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目的:通过对无子宫内膜炎母猪和子宫内膜炎母猪的子宫角和子宫体的细菌菌群分离和鉴定,深入了解子宫内膜炎母猪的子宫内致病菌的种类和致病菌的药物敏感性,探讨母猪子宫内膜炎的主要致病因素,为母猪子宫内膜炎的预防和治疗提供科学依据。方法:按屠宰程序剖杀母猪,选择15头无子宫内膜炎的淘汰母猪和45头子宫内膜炎母猪为试验对象。(1)取子宫内膜炎病变组织,观察子宫黏膜组织病理学变化。(2)无菌采集母猪子宫体、子宫角的粘液样品,接种于肉汤内,37℃培养24~48h。将液体培养物接种于绵羊血琼脂平板,需氧培养24~48h。根据培养基上生长的不同种类细菌,分离培养纯培养物,染色、镜检,确定G~+细菌、G~-细菌。选择适当的试剂条,用ATB自动细菌鉴定及药敏测试仪对纯培养物进行生化鉴定。(3)每种经过鉴定的菌株,随机抽取2株,腹腔注射小白鼠,观察有无致病性。(4)用ATB自动细菌鉴定及药敏测试仪对致病性菌株进行药敏试验。(5)设计引物,对致病性菌株进一步进行PCR鉴定。结果:(1)从45头子宫内膜炎母猪的子宫体共分离到44株细菌,细菌种类主要为大肠杆菌(27%)、铜绿假单胞菌(16%)、恶臭假单胞菌(14%),嗜水气单胞菌(7%);从子宫角共分离到26株细菌,细菌种类主要为大肠杆菌(31%)、铜绿假单胞菌(12%)、恶臭假单胞菌(15%)、嗜水气单胞菌(15%)。从15头无子宫内膜炎的母猪的子宫体分离到两株细菌,为大肠杆菌、铜绿假单胞菌;子宫角未分离到细菌。(2)所有分离菌株进行动物致病性试验的结果表明,铜绿假单胞菌、嗜水气单胞菌对动物有致病性,其他分离菌对动物无明显的致病性。(3)药敏试验结果表明,分离得到的10株铜绿假单胞菌和7株嗜水气单胞菌对28种抗生素都有不同程度的耐药性。70%以上的铜绿假单胞菌分离株对青霉素、红霉素、林可霉素、复方阿莫西林、苯唑西林、磺胺甲恶唑、链霉素、氟甲喹、卡那霉素、奥索利酸、庆大霉素、夫西地酸、利福平均有显著耐药性,少部分(10%-20%)的铜绿假单胞菌分离株对原始霉素、头孢噻吩、头孢哌酮、安普霉素、多西环素有耐药性。70%以上的嗜水气单胞菌分离株对青霉素、红霉素、阿莫西林、林可霉素、复方阿莫西林、原始霉素、苯唑西林、泰洛星、头孢噻吩、复方磺胺甲恶唑、链霉素、磺胺甲恶唑、卡那霉素、奥索利酸、依氟沙星均有显著耐药性,少部分(10%-20%)的嗜水气单胞菌分离株对多粘酶素E、头孢哌酮、安普霉素、呋喃妥因、利福平、多西环素有耐药性。(4)母猪子宫内膜炎的组织病理学变化主要为上皮空泡化、黏膜上皮脱落、固有层中出现坏死灶和炎性细胞浸润。结论:(1)生产母猪高淘汰率与母猪子宫炎发生率有关。(2)环境中常在细菌是母猪子宫内膜炎主要的条件性致病菌。不同猪场的母猪子宫内膜炎的条件性致病菌种类与分布不同。(3)主要的条件性致病菌耐药谱不完全相同,但对大部分临床常用抗生素均有较强的耐药性。(4)母猪子宫内膜炎的病理变化完全符合细菌感染导致炎症性的病理变化过程。
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