【摘 要】
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目的:信号素4D (Sema4D)是神经轴突生长锥导向分子,在神经系统发育过程中扮演重要角色。但越来越多的证据支持其在血管新生中的作用。本文利用慢病毒介导的基因转导,通过体外
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目的:信号素4D (Sema4D)是神经轴突生长锥导向分子,在神经系统发育过程中扮演重要角色。但越来越多的证据支持其在血管新生中的作用。本文利用慢病毒介导的基因转导,通过体外细胞迁移实验和结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,研究Sema4D对肿瘤血管新生的影响。方法:根据Sema4D和VEGF的表达量,及对慢病毒转导的敏感性和耐受性,从5个结直肠癌细胞系中选出HCT-116和Caco-2。每个细胞系设4个实验组,由对应功能的慢病毒感染获得:无病毒感染组、对照病毒感染组、Sema4D过表达组和Sema4DshRNA干扰组。Transwell迁移实验检测各组癌细胞诱导内皮细胞运动迁移的能力。各实验组分别接种裸鼠,观察记录肿瘤生长,收获移植瘤做免疫组化和免疫荧光检测。结果:研究发现干扰Sema4D的表达能减弱癌细胞诱导内皮细胞迁移的能力,减缓裸鼠皮下移植瘤生长速度并降低瘤内血管密度。过表达Sema4D能够增强癌细胞诱导内皮细胞迁移的能力,也能在一定程度上促进移植瘤的生长并提高瘤内血管密度。Sema4D对移植瘤生长和血管网密度的作用效果,受细胞自身性质尤其是VEGF水平的影响。结论:由于Sema4D在诱导血管新生中的作用,干扰其信号通路将可能通过抑制血管新生来阻止肿瘤生长或转移,因此Sema4D有可能成为肿瘤抗血管新生疗法中有价值的治疗靶点。
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