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第一部分:体外实验探讨氯沙坦对乳腺癌细胞放疗敏感性的影响
目的：体外实验探究LOS对乳腺癌细胞放射敏感性的影响。
方法：1.CCK8法检测0μM、50μM、100μM和200μMLOS对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231、4T1增殖能力的影响；2.免疫荧光染色检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞γ-H2AX焦点形成的影响；3.克隆形成实验检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞放射敏感性的影响；4.流式细胞术检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞凋亡以及细胞周期的影响。
结果：1.药物浓度在0-200μM范围内对细胞增殖能力并不产生影响，选取LOS200μM进行后续细胞实验。2.放疗后细胞焦点数目增加，但LOS预处理组与单纯放疗组相比，γ-H2AX焦点数并无明显差异，这说明LOS预处理并不能增加X线照射引起的DNA损伤。3.LOS预处理组与对照组相比，放疗后细胞克隆数无差别，LOS不能增加细胞的放射敏感性。4.LOS预处理后联合放疗与单纯放疗组相比，两种细胞的G2/M期细胞阻滞、细胞凋亡率均未见明显增加。
结论：LOS不能增加三阴性乳腺癌细胞固有放射敏感性。
第二部分:体内实验探讨LOS对乳腺癌放疗敏感性的影响
目的：体内实验探究LOS对乳腺癌放射敏感性的影响。
方法：1.在BALB/C小鼠建立小鼠乳腺癌移植瘤模型，摸索最佳LOS药物浓度。应用LOS灌胃(20mg/kg，30mg/kg，40mg/kg)，观察对小鼠移植瘤瘤体生长的影响；2.在BALB/C小鼠,BALB/C-nu/nu裸鼠建立乳腺癌移植瘤模型，观察LOS(20mg/kg)联合放疗对小鼠移植瘤瘤体生长的影响。
结果：1.单独应用LOS灌胃(30mg/kg，40mg/kg)即可减小瘤体体积，抑制肿瘤生长；当LOS灌胃剂量缩小至(20mg/kg)，对小鼠肿瘤生长无影响。这说明乳腺癌对LOS的反应有剂量依赖性，我们选取小剂量LOS(20mg/kg)在单独应用不影响肿瘤生长的前提下，进行后续实验。2.在BALB/C小鼠(免疫系统健全)中，LOS与放疗联合组相比单纯放疗组，瘤体体积缩小，肿瘤生长延缓，说明LOS可以增加小鼠乳腺癌放射敏感性。3.在BALB/C-nu/nu裸鼠(免疫系统缺陷)中，LOS与放疗联合组相比单纯放疗组，瘤体体积并未缩小。说明LOS增加小鼠乳腺癌放射敏感性依耐于免疫系统的参与。
结论：LOS增加乳腺癌放疗敏感性依耐于健全的免疫系统。
第三部分:LOS增加乳腺癌放疗敏感性的免疫学机制
目的：LOS对放疗后肿瘤微环境中免疫细胞数目与功能的影响。
方法：1.在BALB/C小鼠建立小鼠乳腺癌移植瘤模型，小鼠腹腔注射anti-CD8单抗清除体内CD8(+)T细胞，观察其对小鼠乳腺癌移植瘤瘤体生长的影响；2.应用流式细胞术、免疫组织化学、免疫组织荧光检测LOS联合放疗对MDSC数目及功能的影响；TAMs数目及和功能的影响；T淋巴细胞数目及功能的影响；3.应用RT-PCR，蛋白芯片技术检测LOS联合放疗对趋化因子表达的影响(mRNA和蛋白水平)；4.应用免疫组织荧光检测LOS联合放疗对Pimonidazole，CD34，α-SMA表达的影响。
结果：1.LOS不影响肿瘤微环境中总的MDSC的数目；LOS可降低肿瘤组织Arg-1和iNOS阳性细胞数，说明LOS可以降低MDSC的免疫抑制功能。2.LOS可降低肿瘤微环境中TAM的数目；同时LOS可增加肿瘤微环境中M1型巨噬细胞比例，降低M2型巨噬细胞比例，说明LOS可促进TAM向M1型巨噬细胞极化。3.LOS可增加放疗后肿瘤微环境中CD8(+)T细胞浸润，并增加CD8(+)T细胞分泌GranzymeB。4.LOS对小鼠乳腺癌移植瘤的放疗增敏作用主要依耐CD8(+)T细胞。5.LOS联合放疗不影响免疫细胞趋化因子的表达；可降低α-SMA阳性细胞数目；增加周细胞覆盖率；改善乏氧。
结论：LOS通过使血管正常化，改善乏氧来重塑免疫抑制微环境。
目的：体外实验探究LOS对乳腺癌细胞放射敏感性的影响。
方法：1.CCK8法检测0μM、50μM、100μM和200μMLOS对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231、4T1增殖能力的影响；2.免疫荧光染色检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞γ-H2AX焦点形成的影响；3.克隆形成实验检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞放射敏感性的影响；4.流式细胞术检测200μMLOS与4GyX线照射联合作用对细胞凋亡以及细胞周期的影响。
结果：1.药物浓度在0-200μM范围内对细胞增殖能力并不产生影响，选取LOS200μM进行后续细胞实验。2.放疗后细胞焦点数目增加，但LOS预处理组与单纯放疗组相比，γ-H2AX焦点数并无明显差异，这说明LOS预处理并不能增加X线照射引起的DNA损伤。3.LOS预处理组与对照组相比，放疗后细胞克隆数无差别，LOS不能增加细胞的放射敏感性。4.LOS预处理后联合放疗与单纯放疗组相比，两种细胞的G2/M期细胞阻滞、细胞凋亡率均未见明显增加。
结论：LOS不能增加三阴性乳腺癌细胞固有放射敏感性。
第二部分:体内实验探讨LOS对乳腺癌放疗敏感性的影响
目的：体内实验探究LOS对乳腺癌放射敏感性的影响。
方法：1.在BALB/C小鼠建立小鼠乳腺癌移植瘤模型，摸索最佳LOS药物浓度。应用LOS灌胃(20mg/kg，30mg/kg，40mg/kg)，观察对小鼠移植瘤瘤体生长的影响；2.在BALB/C小鼠,BALB/C-nu/nu裸鼠建立乳腺癌移植瘤模型，观察LOS(20mg/kg)联合放疗对小鼠移植瘤瘤体生长的影响。
结果：1.单独应用LOS灌胃(30mg/kg，40mg/kg)即可减小瘤体体积，抑制肿瘤生长；当LOS灌胃剂量缩小至(20mg/kg)，对小鼠肿瘤生长无影响。这说明乳腺癌对LOS的反应有剂量依赖性，我们选取小剂量LOS(20mg/kg)在单独应用不影响肿瘤生长的前提下，进行后续实验。2.在BALB/C小鼠(免疫系统健全)中，LOS与放疗联合组相比单纯放疗组，瘤体体积缩小，肿瘤生长延缓，说明LOS可以增加小鼠乳腺癌放射敏感性。3.在BALB/C-nu/nu裸鼠(免疫系统缺陷)中，LOS与放疗联合组相比单纯放疗组，瘤体体积并未缩小。说明LOS增加小鼠乳腺癌放射敏感性依耐于免疫系统的参与。
结论：LOS增加乳腺癌放疗敏感性依耐于健全的免疫系统。
第三部分:LOS增加乳腺癌放疗敏感性的免疫学机制
目的：LOS对放疗后肿瘤微环境中免疫细胞数目与功能的影响。
方法：1.在BALB/C小鼠建立小鼠乳腺癌移植瘤模型，小鼠腹腔注射anti-CD8单抗清除体内CD8(+)T细胞，观察其对小鼠乳腺癌移植瘤瘤体生长的影响；2.应用流式细胞术、免疫组织化学、免疫组织荧光检测LOS联合放疗对MDSC数目及功能的影响；TAMs数目及和功能的影响；T淋巴细胞数目及功能的影响；3.应用RT-PCR，蛋白芯片技术检测LOS联合放疗对趋化因子表达的影响(mRNA和蛋白水平)；4.应用免疫组织荧光检测LOS联合放疗对Pimonidazole，CD34，α-SMA表达的影响。
结果：1.LOS不影响肿瘤微环境中总的MDSC的数目；LOS可降低肿瘤组织Arg-1和iNOS阳性细胞数，说明LOS可以降低MDSC的免疫抑制功能。2.LOS可降低肿瘤微环境中TAM的数目；同时LOS可增加肿瘤微环境中M1型巨噬细胞比例，降低M2型巨噬细胞比例，说明LOS可促进TAM向M1型巨噬细胞极化。3.LOS可增加放疗后肿瘤微环境中CD8(+)T细胞浸润，并增加CD8(+)T细胞分泌GranzymeB。4.LOS对小鼠乳腺癌移植瘤的放疗增敏作用主要依耐CD8(+)T细胞。5.LOS联合放疗不影响免疫细胞趋化因子的表达；可降低α-SMA阳性细胞数目；增加周细胞覆盖率；改善乏氧。
结论：LOS通过使血管正常化，改善乏氧来重塑免疫抑制微环境。