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本论文利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术和实时荧光定量(q PCR)比较分析了饲喂不同中性洗涤纤维(NDF)水平日粮杂交水牛瘤胃细菌的多样性和数量差异,试验设计和结果如下:一、杂交水牛瘤胃微生物的多样性:为了研究杂交水牛瘤胃内与水牛耐粗饲相关的菌群,本试验改变日粮的营养组分,设计了3种不同日粮NDF水平(38%、44%、51%)。同时选择3头体况相近、健康、装有永久性瘤胃瘘管的杂交水牛,采用3×3拉丁方试验设计,试验分三期,每一期饲喂21天,最后一天采集瘤胃内容物,实验室提取总DNA,利用DGGE分析瘤胃液相与固相细菌群落结构。结果表明,(1)不同NDF水平日粮条件下,杂交水牛瘤胃固相与液相细菌群落区系都显示出了一定的差异性,但差异性并不显著。(2)在不同NDF水平日粮条件下,拟杆菌门与厚壁菌门均为瘤胃内的优势菌群。(3)在杂交水牛瘤胃液相细菌区系中,当NDF水平为44%时,瘤胃内瘤胃球菌属(Ruminococciis sp.)、解纤维热酸菌(Acidothermus cellulolyticus)、解纤维梭菌(Clostridium cellulolyticum)与另两组存在差异。在杂交水牛瘤胃固相细菌区系中,当NDF水平为38%时,普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)较另外两组有差异。二、不同NDF水平日粮时杂交水牛瘤胃主要功能菌群的数量变化:通过Q-PCR的方法,分析了饲喂不同NDF水平日粮时杂交水牛瘤胃主要功能菌群的数量变化情况。结果表明:不同NDF水平日粮条件下,各组总普雷沃氏菌数量未产生显著性差异,但普雷沃氏菌属细菌数量在总细菌数量中占优势地位。反刍兽新月行单胞菌受到日粮NDF水平的影响,当NDF水平为44%时,数量最多。纤维降解菌产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌和黄色瘤胃球菌数量在各NDF水平下未产生显著性差异,但高NDF水平组数量高于另外两组,可能是由于日粮差异不够显著。不同NDF水平下脂解厌氧弧菌数量未受到影响。