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1.目的研究雌激素、雄激素及其剂量比例变化对去势大鼠前列腺生长的影响,揭示雄激素对前列腺上皮细胞染色体有丝分裂方向改变的现象,从而探索生物机体内雌、雄激素含量变化而影响良性前列腺增生发生的机制。2.方法分别选用雄性3月龄SD大鼠222只和4月龄SD大鼠56只。其中3月龄大鼠随机分为37组,分别为:35个不同雌/雄激素比例组、正常对照组和去势对照组;4月龄大鼠随机分为7组,分别为对照组、雌激素3个时间点组和雄激素3个时间点组。均去势,3月龄大鼠恢复1周后开始给药(给药组分别注射不同配伍剂量的雌/雄激素、对照组均注射生理盐水各一个月),而4月龄大鼠恢复1月后单次皮下注射雌激素或雄激素。均在最后一次注药后24h麻醉、取血、处死、取材,称取前列腺重量,测量体积,并计算脏器系数,其中4月龄鼠于处死前2小时腹腔注射Brdu(2mg/100g)。组织标本均制成病理切片并分别进行HE染色、特殊染色和免疫组化染色。4月龄大鼠前列腺组织做基因芯片和RT—PCR检测Wnt信号转导通路和雄激素信号转导通路相关基因。3.结果连续一个月给药实验:当丙酸睾丸酮给药剂量分别为每只鼠0.02、0.1、0.5、2.5和12.5mg时,均未见器官增生程度与苯甲酸雌二醇注射剂量呈负相3关。丙酸睾丸酮给药剂量每只鼠为0.1mg时,随着苯甲酸雌二醇注射量增加,前列腺体积及其系数有所增大,而当每只鼠苯甲酸雌二醇注射量达到50ug/kg以上时,前列腺腺腔面积比正常对照组明显增大,免疫组化也发现少量AR表达,此时器官增生程度不再随苯甲酸雌二醇注射剂量增加而增加。单次给药实验:TP单次注射24、36和48h组可见到前列腺上皮细胞染色体有丝分裂方向与基底膜平行,而对照组和雌激素24、36和48h组均见到前列腺上皮细胞染色体有丝分裂方向与基底膜垂直。Brdu免疫组化可见TP三组前列腺间质和上皮均有Brdu标记细胞阳性表达,E三组仅在前列腺间质见到阳性表达,而对照组前列腺和所有组的肝脏、皮肤、小肠和大肠均未发现Brdu标记细胞。TP注射后改变前列腺上皮细胞有丝分裂的方向,是TP对前列腺作用的新发现。基因芯片和RT—PCR结果证实:TP组促进细胞增殖的基因如雄激素受体相关蛋白(RAN)、TGM4和Wnt通道的WNT2等基因均2倍上调,而抑制细胞增殖的基因如负调控Wnt通道的DKK3和促进细胞凋亡的Fas等基因2倍下调。4.结论(1)雌激素发挥作用需以雄激素存在为前提,雌/雄激素比例在前列腺疾病发展中,起着一定作用。(2) TP可以改变前列腺上皮细胞染色体有丝分裂的方向。(3) Wnt和AR信号转导通路参与细胞增殖和有丝分裂方向改变,促使BPH发生。