【摘 要】
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目的：前期阿德福韦酯Ⅲ期临床研究中发现HBV逆转录酶区多态性位点rtN118H及变异位点rtH126Y，验证这些位点是否与ADV原发性耐药有关。方法:通过FSR（Fragment substitution reacti
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目的：前期阿德福韦酯Ⅲ期临床研究中发现HBV逆转录酶区多态性位点rtN118H及变异位点rtH126Y，验证这些位点是否与ADV原发性耐药有关。方法:通过FSR（Fragment substitution reaction）的方法，将源于耐药患者的含有rtN118H的HBV序列，构建到质粒PCH9-EGFP上(PCH9-1)；定点诱变含有HBV基因型D型的野生型质粒PCH9-EGFP，使其含有rtN118H突变(PCH9-118)。然后将两种方法得到的重组或诱变质粒转染肝癌细胞系HepG2进行体外ADV表型耐药分析。结果：通过两种方法构建的重组质粒都能够成功转染HepG2细胞，并且都能够在体外很好的表达HBsAg和HBeAg。含有野生型HBV序列的质粒(PCH9-EGFP)对ADV的IC500.109±0.004μM；通过FSR构建的含有rtN118H的诱变质粒(PCH9-1)对ADV的IC500.112±0.001μM（P>0.05）；通过定点诱变方式含有rtN118H的突变质粒(PCH9-118)对ADV的IC500.108±0.002μM(P>0.05)；与野生型相比无差异性，没有统计学意义。结论：rtN118H变异位点对ADV仍然很敏感，该位点可能与与ADV原发性耐药无关，提示rtN118H变异后，ADV治疗仍然有效。
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