赤松(Pinus densiflora)高大的乔木,能形成外生菌根。外生菌根菌中大部分是食用菌,松茸就是其中的一种。但遗憾的是到目前为止松茸尚且不能进行人工栽培,松茸与赤松是互惠共生关系,松茸的生长与赤松根际土壤微生物有密切关系。本实验采用DGGE,基因克隆及构建基因文库的方法对松茸子实体及赤松根际土壤微生物进行分析,为研究松茸与赤松的共生关系提供理论依据。研究的结果如下：1、通过对赤松根际土壤微生物PCR反应体系进行优化,确定了最佳的反应体系。即25uL体系中包含模板DNA10ng, dNTPs0.15mM,上下游引物各3.2uM, Taq酶2U,Mg2+1.0mM。并筛选出最佳的引物ITS1F(GC)-ITS2341F(GC)-518R。2、通过对松茸子实体及赤松根际土壤微生物进行PCR-DGGE,可知松茸子实体有细菌入侵,赤松外生菌根菌及根际土壤微生物具有多样性。3、通过对DGGE条带切胶得到25个条带,对条带进行克隆、测序、BLAST比对,确定松茸子实体及赤松根际土壤中有8种真菌,分别是Hypocrea sp.(肉座菌属)、Tricholoma matsutake sp.(松茸菌属)、Cenococcum geophilum sp.(土生空团菌属)、Russula sp.(红菇菌属)、Inocybe sp.(丝盖伞菌属)、Dothideomycetes sp.(座囊菌属)、Cortinarius sp.(丝膜菌属)、Ascomycete sp.(子囊菌属)。所有样品中都有土生空团菌,16个为未培养的真菌。