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目的:两色金鸡菊Coreopsis tinctoria Nutt.的头状花序是维吾尔族民间常用的防治心血管疾病的草药,习称“雪菊”。本课题对其聚炔有效部位的提取、富集工艺进行优化,并对其中的化合物进行分离纯化及结构鉴定;通过对聚炔类化合物的抗炎活性进行研究,探寻两色金鸡菊防治心血管疾病的药效物质基础与作用机理,为两色金鸡菊的质量标准研究与建立提供理论基础。方法:采用单因素法结合正交实验法,对两色金鸡菊头状花序的提取方法进行了考察;采用单因素考察法,对聚炔部位的富集工艺进行了优化;使用硅胶、sephadex LH-20、RP-18反相硅胶等多种常压柱色谱与Semi-PHPLC技术,对两色金鸡菊头状花序中聚炔部位的化合物进行分离纯化,通过1H-NMR、13C-NMR、1H-1HCOSY、HMQC、HMBC和MS等技术对分离得到的化合物结构进行鉴定;以5-LOX、LTA4H、COX-2和12-LOX为靶点,采用计算机分子模拟法中药效团模型建设法结合分子对接法,对两色金鸡菊头状花序中分离得到的聚炔类化合物进行了抗炎活性虚拟筛选;采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞模型的NO生成抑制实验法,对分离得到的7个聚炔类化合物的体外抗炎活性进行了筛选。结合其化学结构与活性研究,对两色金鸡菊头状花序中聚炔类化合物的构效关系进行了初步探讨。结果:本研究得到的两色金鸡菊头状花序的最佳提取工艺为:取适量两色金鸡菊头状花序的样品,粉碎过二号筛,置于圆底烧瓶中,加入16倍量70%乙醇溶液加热回流提取1 h;得到的雪菊聚炔部位富集工艺为:用AB-8大孔树脂柱色谱,柱径高比为1:10,最大上样量为2BV比重为0.224g.mL-1的提取液,洗脱流速为3BV/h,分别用10%甲醇洗脱6 BV、60%甲醇洗脱8 BV、90%甲醇洗脱7 BV,其中90%甲醇洗脱部位为聚.炔部位。本研究共分离得到25个化合物,鉴定出其中16个化合物的结构,其中聚炔类化合物12个,包括1个C14-聚炔,即金鸡菊炔苷A(CoreosideA,F-2);9个C13-聚炔,(2S)-(3Z,1 1Z)-二烯-5,7,9-三炔-1,2-十三碳二醇[(25)-(3Z,11Z)-tridecadiene-5,7,9-Triyne-1,2-diol,G-1]、(25)-(3Z,1 1E)-二烯-5,7,9-三炔-1,2-十三碳二醇[(2S)-(3Z,11E)-tridecadiene-5,7,9-tryne-1,2-diol,G-2]、(2S)-(3E,11Z)-二烯-5,7,9-三炔-1,2-十三碳二醇[(2S)-(3E,11Z)-tridecadiene-5,7,9-triyne-1,2-diol,G-3]、(2S)-(3E,11E)-二烯-5,7,9-三炔-1,2-十三碳二醇[(2S)-(3E,11E)-tridecadiene-5,7,9-triyne-1,2-diol,G-4]、(2R)-(3E,5Z,11E)-三烯-7,9-二炔-1,2-十三碳二醇[(2R)-(3E,5Z,1 1E)-triene-7,9-diyne-1,2-diol,F-4]、(2R)-(3E,5 E,11E)-三烯-7,9-二炔-1,2-十三碳二醇[(2R)-(3E,5E,1 1E)-triene-7,9-diyne-1,2-diol,F-5]、(2R)-(3Z,5E,11E)-三烯-7,9-二炔-1,2-十三碳二醇[(2R)-(3Z,5E,11E)-triene-7,9-diyne-1,2-diol,F-7]、(3E,11Z)-1,2,6-三羟基-3,11-二烯-7,9-二炔-5-十三碳酮[(3E,11Z)-1,2,6-trihydroxytrideca-3,1 1-dien-7-yn-5-one,E-4],(3E,11E)-1,2,6-三羟基-3,11-二烯-7,9-二炔-5-十三碳酮[(3E,1 11E)-1,2,6-trihydroxytrideca-3,1 1-dien-7-yn-5-one,E-5];2个C7-聚炔,(E)-7-苯基-2-烯-4,6-二炔-1-庚醇[(E)-7-phenyl-2-heptene-4,6-diyn-l-ol,ODS-1]、(Z)-7-苯基-2-烯-4,6-二炔-1-庚醇[(Z)-7-phenyl-2-heptene-4,6-diyn-1-o1,ODS-2];黄酮类化合物2个,紫铆查尔酮(butein,E-2)和木犀草素(luteolin,E-3);其他类化合物2个,(-)-e-Viniferin(X-1)和ampelopsinE(X-2);其中化合物F-4、F-7、G-1、E-4和E-5为新化合物,化合物X-1和X-2为首次从金鸡菊属中分离得到。本研究对课题组分离得到14个聚炔类化合进行虚拟活性筛选,最终得到了金鸡菊炔苷D、金鸡菊炔苷B、金鸡菊炔苷A、金鸡菊炔苷E和金鸡菊炔苷C这5个5-LOX潜在活性抑制剂;F-5、金鸡菊炔苷B和金鸡菊炔苷A这3个LTA4H潜在活性抑制剂;金鸡菊炔苷E和金鸡菊炔苷C这2个COX-2的潜在活性抑制剂;得到金鸡菊炔苷C、F-4和F-7这3个12-LOX潜在活性抑制剂。NO体外抗炎活性研究发现7个化合物均显示出一定的抗炎活性趋势。结论:本研究发现两色金鸡菊头状花序聚炔部位中主要为C14-聚炔、C13-聚炔、C7-聚炔,且具有一定的抗炎活性,因此两色金鸡菊聚炔部位是其抗炎的活性部位,是防治冠心病等心血管疾病的药效物质基础之一。