功能化Mn掺杂ZnS量子点的合成及在生物传感和细胞成像中的应用

来源 :南开大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:yongheng0106
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相比于传统的有机荧光染料来说,量子点具有明显的优越性,包括宽而连续的激发光谱、窄而对称的发射光谱、精确可调的发射波长以及强的抗光漂白能力。随着量子点合成和表面功能化研究的发展,量子点在生物样品检测和成像中发挥着越来越重要的作用。本论文旨在合成功能化的Mn掺杂ZnS量子点用于生物样品检测和成像,并简要讨论了量子点与目标物相互作用的机理。主要研究内容如下:(1)发展了一种简便、快速合成高质量水溶性Mn掺杂ZnS量子点的方法,以带正电荷的聚乙烯亚胺为稳定剂,通过微波和超声波的协同作用合成粒径均匀的带正电荷的Mn掺杂ZnS量子点,该量子点对三磷酸鸟苷有高的选择性和灵敏度,能区别于三磷酸腺苷、三磷酸胞苷、三磷酸尿苷、二磷酸腺苷和一磷酸腺苷,为三磷酸鸟苷的检测提供了新方法。在pH7.2的条件下得到了量子点磷光增强值与三磷酸鸟苷浓度之间的线性关系,检出限为0.6μM。对不含三磷酸鸟苷和含有15μM三磷酸鸟苷体系的磷光差值平行测定11次的相对标准偏差为1.7%。聚乙烯亚胺包覆的Mn掺杂ZnS量子点对三磷酸鸟苷的响应在3分钟内就能达到稳定。此外,我们详细考察了聚乙烯亚胺包覆的Mn掺杂ZnS量子点的合成条件、检测过程中的pH值和检测过程中盐度的影响。最终,实现该探针对实际样品中三磷酸鸟苷的检测。结果表明,微波超声波辅助合成的聚乙烯亚胺包覆的Mn掺杂ZnS量子点是一种性能优良的光学探针。(2)采用超声波辅助法合成了具有优良光学性质的三磷酸腺苷包覆的Mn掺杂ZnS量子点,基于超分子Mg2+-三磷酸腺苷-精氨酸三元体系,在Mg2+存在的条件下,三磷酸腺苷包覆的Mn掺杂ZnS量子点实现了对精氨酸和甲基化精氨酸的快速、高选择性和高灵敏度检测。在量子点合成过程中,三磷酸腺苷作为配体可以增强量子点的水溶性和防止量子点聚集,并且保留三磷酸腺苷对目标物识别的特殊官能团。为了考察超声波辅助水相合成方法比传统合成方法的优势,将两种合成方法所得的三磷酸腺苷包覆的Mn掺杂ZnS量子点进行了对比,结果显示,超声波辅助水相合成法对比传统合成方法,不但合成时间短,而且合成量子点的光强比传统方法合成的量子点光强强2.3倍。此外,我们详细考察了三磷酸腺苷包覆的Mn掺杂ZnS量子点对精氨酸检测过程中紫外光谱、共振光散射光谱、磷光寿命和核磁信号的变化。考察了体系的pH值、缓冲溶液的浓度、量子点的浓度和Mg2+的浓度对量子点响应信号的影响。通过实验条件的优化,三磷酸腺苷包覆的量子点在Mg2+存在下对精氨酸和甲基化精氨酸的检测限为0.23μM。最终,实现该探针对实际样品中精氨酸和甲基化精氨酸的检测。(3)设计合成了具有优良性质和低毒的二氧化硅包覆硫离子富集的Mn掺杂ZnS量子点(SiO2-S2--Mn-ZnS)探针,实现了细胞内锌离子的原位成像。额外包入探针的硫离子使Mn掺杂的ZnS量子点表面产生悬空键,外加的锌离子与硫离子相互作用,消除了量子点表面由硫离子引起的悬空键,使得SiO2-S2--Mn-ZnS量子点的光谱增强。二氧化硅的包覆,不但增强了该探针的稳定性和生物相容性,而且在细胞成像过程中刺激了细胞对探针的内吞作用。该方法对Zn2+的检出限为80nM,线性范围在0.315μM,对不含锌离子和含有3μM锌离子体系的光强差值平行测定11次的相对标准偏差为1.2%。
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