麝香乌龙丸对RA患者外周血miR-146a、miR-130及miR-223表达水平的影响

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mcx1988929
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目的研究麝香乌龙丸含药血清对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中微小核糖核酸(miR)-146a、miR-130及miR-223表达水平的影响。方法1制备含药血清:将SPF级SD大鼠12只随机(根据随机数字表法)分为3组:对照组(生理盐水)、麝香乌龙丸组、白芍总苷(TGP)组,分别给予10m L/kg/d生理盐水、麝香乌龙丸水溶剂(200 mg/m L)、TGP水溶剂(20 mg/m L)灌胃7天,腹主动脉取血,提取含药血清,-80℃保存备用。2研究收集2015年11月至2016年5月于华北理工大学附属医院风湿免疫门诊首次确诊且未经过抗风湿治疗,年龄30~50岁30例的RA患者的新鲜静脉血5m L,超净台下提取PBMCs,37℃、5%CO2条件培养24 h后细胞计数。将细胞分为4组:空白对照组(培养基)、空白血清组、麝香乌龙丸含药血清组、TGP含药血清组。37℃、5%CO2条件培养48 h后提取RNA,测定样品RNA在OD260 nm/OD280 nm处的吸光度值,以检测各组样品RNA的纯度及浓度。按照c DNA逆转录试剂盒(MBI公司)说明书合成c DNA,以c DNA为模板采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR),以U6sn RNA为内参照,各组样品设置3个复孔,共40个循环,检测3种miR的表达水平,以2-ΔΔCt表示每种miR相对表达量。结果含药血清干预后,空白对照组和空白血清组相比,3种miR表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与空白血清组和空白对照组相比,TGP含药血清组和麝香乌龙丸含药血清组miR-146a、miR-130及miR-223的表达水平下调,差异有统计学意义(P<0.05);麝香乌龙丸含药血清组与TGP含药血清组相比,miR-223、miR-146a的表达水平下调,差异有统计学意义(P<0.05),miR-130表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论1麝香乌龙丸能够通过下调RA患者PBMCs中miR-223、miR-130及miR-146a的表达水平,从而发挥治疗RA的作用。2麝香乌龙丸下调RA患者PBMCs中miR-223、miR-146a的表达水平优于TGP。
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