三脉紫菀总黄酮、总皂苷制备工艺及其化痰止咳功效研究

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三脉紫菀(Aster ageratoides Turcz.)又名三脉叶马兰,为菊科(Compositae)紫菀属植物。具有润肺下气、化痰止咳、清热解毒等功效;民间常用于煎洗无名肿毒,治疗热感冒,在江西民间是治疗咳喘病的有效单方,并因此得名-换肺草。目前,对三脉紫菀的化学组成有一定研究报道,但对其功能成分及其化痰止咳功效研究相对较少。因此本文对三脉紫菀总黄酮、总皂苷的提取、纯化工艺以及二者对化痰止咳功效进行了研究,为三脉紫菀总黄酮、总皂苷的工业化制备、保健品开发提供基础。主要研究内容与结论概括如下:1、探索了三脉紫菀总黄酮提取、纯化工艺。采用正交试验设计,以总黄酮含量为指标,选用乙醇为提取溶剂,确定了三脉紫菀中黄酮的最佳提取工艺。研究结果表明其最优提取工艺条件为乙醇浓度为60%,浸提温度为50℃,浸提时间为2h,浸提次数为3次,料液比为1:10。比较了HPD-500、HPD-600、HP-20三种大孔树脂对三脉紫菀静态和解吸附能力,以总黄酮的静态吸附量和解吸率为考察指标筛选大孔吸附树脂,优化总黄酮的纯化工艺条件。结果表明HPD-500型大孔吸附树脂性能最好,最佳纯化条件为:以16mg总黄酮/g树脂的上柱量配制成50mg/mL的上柱液,上HPD-500大孔吸附树脂柱,静置1h,用4BV的水洗脱杂质,再用2BV的70%乙醇洗脱。在最佳纯化工艺条件下,富集后总黄酮含量达76.7%,树脂富集倍数为3.83。2、对三脉紫菀总皂苷提取、纯化工艺进行了初步研究。采用正交试验设计,初步确定了最佳提取工艺,最优提取工艺条件为乙醇浓度为60%,浸提温度为30℃,浸提时间为1.5h,浸提次数为1次,料液比为1:8。在此基础上比较HPD-500、HPD-600、HP-20三种大孔树脂对三脉紫菀静态和解吸附能力,以总皂苷的静态吸附量和解吸率为考察指标筛选大孔吸附树脂,优化总皂苷的纯化工艺条件。结果表明HPD-500型大孔吸附树脂性能最好,最佳纯化条件为:总皂苷上HPD-500大孔吸附树脂柱后静置1h,用4BV的水洗脱杂质,再用4BV的70%乙醇洗脱,经富集后总皂苷含量达50.12%,树脂富集倍数2.67。3、确定了三脉紫菀抗炎的有效组分最佳配比。采用基线等比增减设计法设定自身有效组分的不同配比,通过止咳、祛痰实验进行优选最佳配比。在总皂苷、总黄酮部位总量恒定的情况下,两类组分不同配比的祛痰作用具有总皂苷比例依赖性;而止咳作用却不完全取决于总黄酮的比例变化,可能两者在1:1、1:2配比时还存在协同增效的配伍关系。
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