核心岩藻糖基化水平与胃癌相关性的研究

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背景与目的:糖蛋白广泛存在于生物体内,根据其表面糖链类型不同,可分为N连接糖蛋白和O连接糖蛋白。许多研究表明,N连接糖蛋白参与了许多重要的病理进程,如机体的炎症反应、自身免疫性疾病以及肿瘤细胞的恶性转化及转移等,是近些年研究的热点。核心岩藻糖基化是一类重要的蛋白翻译后修饰,也是恶性肿瘤中最重要的异常糖基化修饰。越来越多的研究表明核心岩藻糖基化水平及催化核心岩藻糖合成唯一的糖基转移酶Fut8活性水平的改变与人类许多恶性肿瘤密切相关,但其与胃癌的相关性研究仍然是空白。本研究的目的是对胃癌相关N糖图谱的特征性改变进行鉴定,并探讨核心岩藻糖基化水平的改变对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:总共选取244名胃癌患者、胃溃疡患者及正常对照人群的血清及组织标本。N糖图谱分析采用DSA-FACE法。总的核心岩藻糖基化水平及核心岩藻糖相关酶类的检测分析采用lectin blot、western blot及RT-PCR等方法。建立GDP-岩藻糖转运体(GDP-Fuc transporter)与α-1,6-岩藻糖基转移酶(Fut8)的重组质粒并且将其转染入BGC-823和SGC-7901两型胃癌细胞内,再用CCK-8细胞增殖实验及细胞伤口愈合实验评估核心岩藻糖基化水平的改变对胃癌细胞增殖和转移的影响。结果:我们在胃癌中发现了特征性的血清N聚糖图谱。与健康对照组相比,胃癌组中非核心岩藻糖峰如糖峰5(NA2)和糖峰9(NA3Fb)含量明显升高(P<0.001),而核心岩藻糖峰如糖峰2(NGA2FB),糖峰3(NG1A2F),糖峰6(NA2F),糖峰7(NA2F)的含量在胃癌中明显降低(P<0.001),包括糖峰1,2,3,4,6,7在内的核心岩藻糖基结构丰度总和(sumfuc)在胃癌中也显著降低(P<0.001)。此外,通过实验我们发现相比胃溃疡及健康对照组人群,小扁豆凝集素结合型蛋白在胃癌患者血清中显著减少(P<0.001)。与癌旁组织相比,胃癌组织中α-1,6-岩藻糖基转移酶水平也显著降低(P<0.05)。CCK-8细胞增殖实验及细胞伤口愈合实验结果表明GDP-Tr和FUT8水平的升高可以抑制胃癌细胞的增殖,但对其转移无显著影响。结论:核心岩藻糖基化水平在胃癌中有所下降,上调其水平可以抑制胃癌细胞的增殖,但对其转移无明显影响。
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