艰难梭菌（Clostridium difficile,CD）广泛分布于自然环境中,是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌,属于人体正常肠道菌群。CD是一种条件致病菌,其产毒株过度增殖会引起肠道菌群失调,并释放毒素从而导致CD感染（CD infection,CDI）。CDI是引起抗生素相关性腹泻（Antibiotic-associated diarrhea,AAD）的主要原因,已成为引起全球重视的公共卫生问题,加重了患者家庭及社会的经济负担。CD孢子可通过粪便、肢体接触及空气流动进行传播,而由于儿童手卫生习惯较差,且随着广谱抗生素的普遍应用,近年来儿童中CDI的发病率不断上升,表现为复发率、严重程度及病死率的升高,急待有效的诊治措施。CDI可有轻中度腹泻、伪膜性肠炎、腹膜炎、脓毒血症、甚至中毒性巨结肠等表现,而产毒菌株培养和细胞毒素中和试验是诊断CDI的金标准。目前CDI的治疗包括抗生素、粪菌移植（Fecal microbiota transplantation,FMT）及单克隆抗体等。研究CDI的临床特征并建立能模拟临床上人体CD感染过程的动物模型,对研究CDI的发病机制、疫苗的制备及发现新的治疗方法具有重要意义。本次研究将深入分析儿童群体中CDI的临床特征,并通过临床分离的CD活菌混悬液和使用多种抗生素诱导建立CDI小鼠模型。第一部分:儿童艰难梭菌感染的临床特征分析目的:为了解上海交通大学附属儿童医院消化感染科收治的CDI患儿情况,探讨儿童群体中CDI的临床特征。方法:整理我院消化感染科收治的71例确诊CDI患儿的临床资料,通过分析患儿的基础信息、抗生素暴露史、抑酸剂使用史、临床表现、实验室检查及影像学结果、结肠镜检查、治疗方式、治疗效果及复发情况等来探讨儿童CDI的临床特征。结果:71例确诊CDI的患儿中71%有抗生素暴露史,12.8%有抑酸剂使用史。83.1%的患儿临床表现有腹泻,便血和腹痛分别占32%和31%,腹胀仅11.3%。C反应蛋白平均值（11.21±7.521）mg/L,血清降钙素原平均值（0.820±0.396）ng/ml。CD毒素检测阳性率62%。腹部CT影像学表现为肠壁增厚8例、肠腔积气积液11例。结肠镜结果提示伪膜性肠炎5例、慢性炎症24例。首轮抗生素治疗有单用甲硝唑、万古霉素或联合使用三种治疗方式,有效率无统计学差异,而复发情况具有统计学差异（P<0.05）,单用万古霉素治疗复发率更低。87%的患儿经首轮抗生素治疗后病情好转,其中31%的患儿复发,复发间隔平均2.36周。在复发性CDI和非复发患儿中,性别、临床表现及抑酸剂使用史等高危因素无统计学差异,而抗生素暴露史尤其是头孢菌素类具有统计学差异（P<0.05）。复发性CDI患儿再次接受抗生素治疗有效率78%,复发率14.3%,而FMT有效率100%,均无明显不良反应,且具有统计学差异（P<0.05）。结论:抗生素暴露是儿童CDI的高危因素,腹泻是最常见的临床表现,其次为便血和腹痛,而腹胀较少见。实验室检查中C反应蛋白和降钙素原普遍升高,CD毒素检测阳性率62%,腹部CT影像学主要表现为肠壁增厚、肠腔积气积液,结肠镜典型表现为伪膜性肠炎。首轮抗生素治疗中单用万古霉素治疗的复发率更低。抗生素暴露史尤其是头孢菌素类抗生素是复发性CDI患儿的高危因素。相比再次使用抗生素治疗,儿童复发性CDI进行FMT治疗的有效率更高。第二部分:艰难梭菌感染小鼠模型的建立目的:为更有效地进行CDI疾病发病机制的研究,建立抗生素暴露诱导的CDI小鼠模型。方法:将雄性C57BL/6小鼠18只（8周龄,体重18-22g）分为A、B、C共3组。A组为对照组（6只）正常饮水,B组和C组为实验组（各6只）,B组和C组实验中,小鼠全部接受连续5天的混合抗生素（卡那霉素0.4mg/ml,庆大霉素0.035mg/ml,多粘菌素850U/ml,甲硝唑0.215mg/ml,万古霉素0.045mg/ml）饮水后,自由饮水2天。感染前1天所有实验组小鼠均予克林霉素（10mg/kg）腹腔注射,对照组小鼠予生理盐水0.3ml腹腔注射,然后予CD活菌混悬液（10~6CFU/ml及10~8CFU/ml）分别灌胃B组及C组获得CDI小鼠模型。获得小鼠模型后监测小鼠的体重变化、腹泻及全身情况,收集粪便标本进行荧光定量PCR检测毒素基因,并测量盲结肠长度、必要时组织病理分析等评估造模是否成功。结果及结论:本次造模模型组体重与对照组无明显差异,小鼠均未出现腹泻,未观察到明显湿尾现象,无毛发脱落,未见活动度下降,未发现死亡。小鼠粪便标本留取后,实时荧光定量PCR检测CD毒素基因均无阳性结果。与对照组相比,模型组小鼠结肠长度未见明显差异,盲肠长度增长。