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目的探讨外源性基质金属蛋白酶抑制剂-强力霉素对兔睾丸中度缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用及相关机制,研究强力霉素干预前后携抗基质金属蛋白酶-9抗体脂质微泡(TMB-9)的造影表现,探索一种客观、无创的方法评价睾丸微血管损伤。方法制备普通脂质微泡造影剂(MB)和携抗基质金属蛋白酶-9抗体脂质微泡造影剂(TMB-9),并检测两种造影剂的相关声学特性。将36只兔子随机分为对照组(S1组、S2组)、缺血再灌注组(R1组、R2组)、强力霉素干预组(D1组、D2组),共6组,每组6只。随机结扎一侧精索,建立术侧睾丸完全缺血模型,缺血4h后,对术侧睾丸行复灌注,R1、D1组复灌注成功后饲养1天,R2、D2组饲养4天。对照组(S1组、S2组)暴露精索后穿线但不结扎。强力霉素干预组(D1组、D2组)、S1组给予强力霉素腹腔注射20mg/(kg×d),缺血再灌注组(R1组、R2组)、S2组腹腔注射等量生理盐水。术前、各组模型建立成功后每组均行MB和TMB-9超声造影,运用超声造影量化分析技术分析各组造影参数的变化,包括PI、TP、Slope、MTT、DT/2及AUC,比较二者评价效果。造影结束后,各组兔子经穿刺取心脏血3ml,实验室检测血浆NO、ET-1及v WF含量。造影结束后术侧睾丸组织行HE染色切片及免疫组织化学染色切片检查,对比观察各组间病理改变及MMP-9表达水平的变化。结果脂质微泡造影剂呈乳白色的悬浊液体,光镜下粒径大小较均一,约3.0-6.0μm。室温条件下,静置30min后,微泡数量减少,静置1天后,镜下微泡数量明显减少,粒径大小不一。各组术前MB及TMB-9各项造影参数均无显著性差异(P>0.05)。缺血再灌注组R1组较S2组,MB超声造影参数PI、AUC、MTT、DT/2明显增大,TP明显减小(P<0.05)。而TMB-9各项造影参数变化较MB则更加明显,PI、AUC、MTT、DT/2明显增大,TP明显减小(P<0.01),Slope增大(P<0.05)。复灌注4天后,较R1组,R2组MB的PI降低(P<0.05),而其它参数无显著性差异(P>0.05)。而R2组TMB-9造影参数较R1组PI、Slope降低(P<0.05),而其它参数无显著性差异(P>0.05)。强力霉素干预组D1组MB、TMB-9造影参数较R1组,PI、MTT、DT/2、AUC均减小(P<0.05)。复灌注4天后,较R2组,D2组MB、TMB-9造影参数PI、MTT、DT/2、AUC明显降低(P<0.01)。较对照组,MB各造影参数均无显著差异(P>0.05)。TMB-9造影参数较对照组仅PI升高(P<0.01),而其它参数则无显著性差异(P>0.05)。术前各组血浆v WF、NO、ET-1含量均无显著性差异(P>0.05)。术后R1组血浆v WF、ET-1、NO含量明显升高(P<0.01)。R2组血浆v WF、ET-1含量较R1组进一步升高(P<0.01),而NO含量无显著性差异(P>0.05)。D1组术后血浆v WF、ET-1、NO含量较S1组明显升高(P<0.01)。D2组血浆v WF含量进一步升高(P>0.05),而ET-1、NO含量则无显著性差异(P>0.05)。病理检测结果:对照组S1、S2组睾丸间质微血管结构完整、清晰,无扩张充血。缺血再灌注组R1、R2组睾丸间质微血管充血淤血,管壁结构模糊,周围间质大量红细胞漏出及炎症细胞浸润。免疫组化染色显示睾丸微血管基底膜MMP-9大量表达。强力霉素干预组D1、D2组较缺血再灌注组血管基底膜MMP-9表达量明显减少(P<0.01),睾丸微血管基底膜结构尚清晰,周围间质中浸润的炎症细胞和漏出的红细胞则明显消退。结论1.强力霉素能有效抑制睾丸中度缺血再灌注损伤微血管基底膜MMP-9的表达,有助于维持微血管基底膜及周边间质的完整性,减轻损伤。2.TMB-9比MB能够更敏感、客观地评价睾丸微血管基底膜的损伤程度。