胃癌浸润转移相关质膜蛋白的鉴定及CDH4/R-Cadherin的功能学研究

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胃癌的发生、发展是一个涉及多种基因和多种蛋白质的相互作用以及多种信号通路的相互调节的复杂过程。鉴于细胞质膜蛋白在生命活动过程中的重要作用以及在药物治疗领域的关键地位,对胃癌细胞质膜蛋白的研究将有助于进一步了解肿瘤浸润、转移的机制,为药物研究提供新的思路。本研究采用荧光素/生物素双标记——亲和素纯化富集技术对胃癌细胞质膜蛋白进行富集纯化,并联合鸟枪法蛋白质组学技术获得了直观、大量、完整的与胃癌浸润相关的质膜蛋白谱。通过gene ontology数据库及pubmed数据库对细胞质膜蛋白的生物学功能归类、分析后发现,在所筛选出的36种质膜蛋白中,HSP90、R-cadherin、AIFM1、S100A9等4种质膜蛋白已被证实与胃癌的发生、发展相关。由CDH4基因编码的R-cadherin,是钙黏蛋白家族成员之一。本研究验证了其在细胞水平和组织水平上均有表达,且在胃癌中呈低表达。为明确R-cadherin在胃癌中的作用,本研究从正常胃粘膜上皮中克隆出CDH4基因,构建其真核表达载体并将其转染至胃癌细胞株BGC-823后,进而筛选出稳定转染CDH4的胃癌细胞株。转染后细胞的生长增殖实验、细胞划痕实验及Transwell小室功能实验结果显示,CDH4可抑制胃癌细胞的增殖能力,降低胃癌细胞的迁移运动能力和黏附能力。本研究结果说明,CDH4/R-cadherin可抑制胃癌细胞的恶性生物学行为;CDH-4是胃癌的潜在肿瘤抑制基因,R-cadherin可能成为抗肿瘤药物的靶标。
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