目的观察小鼠巨噬细胞新近发现的促炎性细胞因子HMGB1的表达和功能以及LALF(ENP)对其表达和功能的影响,从而探讨LALF对晚期内毒素血症的保护机制。方法分别用LPS及TNF-α刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,加入LALF,采用RT-PCR半定量分析检测HMGB1 mRNA的表达。用HMGB1刺激小鼠腹腔巨噬细胞,加入LALF,采用微孔隔离室迁移实验观察巨噬细胞的迁移作用,用ELISA检测培养上清中TNF-α浓度。用LALF及LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测表面受体TLR2的表达。结果1、LPS和TNF-α刺激后RAW264.7细胞HMGB1 mRNA表达增强,与对照组比较P<0.05。2、在趋化实验中巨噬细胞迁移指数的增加呈HMGB1剂量依赖性;HMGB1刺激后巨噬细胞培养上清液TNF-α浓度显著增高。3、LALF共作用组与单独LPS或TNF-α作用组比较RAW264.7细胞HMGB1 mRNA表达明显降低。4、与单独HMGB1的对照组相比,LALF与HMGB1预混合降低巨噬细胞的迁移指数和培养上清中TNF-α浓度。5、流式细胞技术检测显示LALF显著增加TLR2阳性巨噬细胞的百分比;LALF显著增加LPS诱导的巨噬细胞表面受体TLR2的表达。结论1、LPS及TNF-α均能增强HMGB1 mRNA在RAW264.7细胞的表达。HMGB1能趋化和活化小鼠腹腔巨噬细胞。2、LALF对LPS及TNF-α诱导的HMGB1 mRNA的表达及HMGB1的功能均具有抑制作用。3、LALF促进小鼠腹腔巨噬细胞表面重要的模式识别受体TLR2的表达。