本试验以安徽农业大学茶园中龙井 43 的芽尖、花蕾以及其茶籽培养的幼根为研究对象,采用传统的压片法、去壁低渗法、风油精法三种制片方法,进行系统的比较和分析,这三种方法均能找到茶树体细胞有丝分裂相。常规压片法能检查出茶树染色体数目,并可对其一般形态进行观察分析。去壁低渗方法可进行茶树染色体核型、带型分析以及用于原位杂交。风油精法简化了制片的程序,适合茶树染色体快速计数,也可做核型分析。通过对芽尖和花蕾以及幼根这些材料的比较,表明芽尖是制片方法的最适宜的材料,它易于获取,又便于找有丝分裂相的最佳时间。 通过观察茶树有丝分裂的过程,找出有丝分裂的各个时期,然后对其中期进行核 型 分 析 、 对 其 早 中 期 进 行 G 带 分 析 。 分 析 表 明 , 茶 树 的 核 型 公 式 为2n=30=14m+12sm+2st+2sm(SAT),核型分类属 2B 型,染色体基数为 15,属二倍体;G带分析发现每条染色体均有多重的 G 带带纹,且大部分端粒和着丝粒子都显带纹;不同的染色体和染色体臂在带纹的分布、大小及着色的深浅等方面互有差别;根据带型,同源染色体,染色体臂和区段之间能较好地配对。 本试验利用 PCR 法合成 1.4kb 咖啡碱合成酶基因探针,采取染色体原位杂交方法,将茶树咖啡碱合成酶基因初步定位在第 9 染色体上。这些研究填补了茶树相关基因在染色体上定位这一研究领域的空白,对茶树基因图谱的构建,完善茶树染色体的理论和进一步开展遗传学研究有一定的参考价值。同时,对全面了解该酶基因、以及利用基因工程技术培育出低(高)咖啡碱茶树品种也具有一定的意义。