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研究背景与目的:耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)是一种耐受极端电离辐射的微生物。PprI在耐辐射奇球菌中起辐射响应总开关作用,PprM可能是一种PprI依赖的辐射响应的新型调控蛋白。本实验旨在构建稳定遗传表达抗辐射基因pprM/pprI的果蝇模型。研究抗辐射基因pprM/pprI转入果蝇后辐射抗性的影响,为辐射损伤治疗提供新思路。为监测核事故泄漏生物计量以及进一步研究耐辐射奇球菌的辐射防御机制及人类的辐射医学防护提供一定的实验依据。研究方法:1、用pGEX-6p-1-pprM、pDsRed1-N1-flag-pprI为PCR底物模板,扩增pprM、pprI基因,构建pattb-UAST-HA-pprM和pattb-UAST-HA-pprI载体。2、果蝇显微注射技术将pattb-UAST-HA-pprM和pattb-UAST-HA-pprI载体注射入果蝇胚胎中,构建转基因果蝇模型。3、提取辐照前后果蝇的总蛋白,并分别检测转基因果蝇和对照果蝇的总超氧化物歧化酶(SOD)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、过氧化氢酶(CAT)活力以及丙二醛(MDA)含量。设置维生素E处理组作为阳性对照对辐照前后果蝇的氧化损伤进行评价。研究结果:1、构建pattb-UAST-HA-pprI,pattb-UAST-HA-pprM载体成功。2、显微注射和筛选得到稳定遗传的pprI/pprM转基因果蝇,通过表型鉴定出pprM/pprI分别插入在果蝇的二号和三号染色体上。3、与对照组果蝇相比pprI转基因果蝇的氧化抗性及辐射抗性有所增强。结论:成功构建了PprM/PprI表达载体,通过显微注射和筛选得到了稳定遗传的pprI/pprM转基因果蝇品系,验证了pprI/pprM转基因果蝇的抗辐射能力。