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长链非编码RNA在多种疾病特别在恶性肿瘤中异常表达并在其肿瘤发生发展过程中起关键性作用,但在人类脑胶质瘤中鲜有文献报道。本研究致力于研究lncRNA在脑胶质瘤中可能产生的作用。项目组利用lncRNA表达谱芯片技术对三例胶质瘤组织进行检测,检测结果发现在肿瘤组织中,相对于瘤周组织平均4858条lncRNA发生显著改变,其中2845条lncRNA被检测出在肿瘤中上调(倍数改变>3.0),2013条lncRNA发生明显下调(倍数改变e<1/3)。同时,平均4084条mRNA表达发生改变,2280条表达量上升(倍数改变>3.0),1804表达量下降(倍数改变e<1/3)。随后,通过差异表达显著程度和lncRNA在组织中的基础表达量为标准选择了六条lncRNA (ak125809,ak098473, uc002ehu.1, bc043564, NR027322, uc003qmb.2)利用实时定量PCR在40例胶质瘤病人的肿瘤和瘤周组织中进行了验证,6条1ncRNA在肿瘤中有明显的表达差异,并与芯片结果一致。我们利用差异表达的lncRNA和mRNA建立了共表达网络,其中显示很多mRNA,如LOC729991、NUDCD1、SHC3、PDGFA、MDM2等以及lncRNA如 ENST00000425922、ENST00000455568、uc002ukz.1、ENST00000502715和 NR027873在胶质瘤形成中起到关键作用。在通路分析中,我们发现’’GLIOMA"信号通路具有很高的富集度,并且其中的关键基因如SHC3、PDGFA、MDM2等与lncRNA表达改变关系密切,并有作为相应lncRNA下游靶基因的潜力。本研究在全基因组范围内运用lncRNA芯片技术在胶质瘤中进行检测,并在大量病例样本中进行验证,通过建立lncRNA-mRNA共表达网络,以及通路分析等分析,进一步预测了lncRNA的靶基因。研究结果表明,有一系列lncRNA在胶质瘤组织中有显著的表达差异,如ak125809, ak098473, uc002ehu.1等在肿瘤中表达上调,bc043564, NR027322, uc003qmb.2等则在肿瘤中表达量有明显减少,而这种差异提示了lncRNA在肿瘤发生发展中起到关键的作用。’’GLIOMA"signal pathway可能是lncRNA参与调控胶质瘤发生发展的通路之一。近年大量的研究结果证实长链非编码RNA (lncRNAs)在肿瘤的发生发展过程中发挥了重要的调控作用。报道称LncRNA SPRY4-IT1 (GenBank ID:AK024556)在黑色素瘤中高表达,并且与黑色素瘤细胞的迁移能力相关。本研究拟通过检测SPRY4-IT1在脑胶质瘤中的表达,研究SPRY4-IT1对脑胶质瘤细胞功能的影响,初步揭示SPRY4-IT1在脑胶质瘤中的作用及相关分子机制。收集40例脑胶质瘤手术标本(癌组织和癌旁组织),荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测40例标本中S PRY4-IT1的表达,并分析其与临床病理资料的关系;qRT-PCR分别检测脑胶质瘤细胞U87, U251和瘤周组织中SPRY4-IT1的表达。构建质粒和慢病毒,建立过表达SPRY4-IT1的稳转细胞株,用CCK-8、流式细胞技术、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞的增殖、凋亡和迁移能力。显微镜下观察SPRY4-IT1低表达和过表达前后细胞形态的变化;SPRY4-IT1在脑胶质瘤组织中的表达量(1.6±0.4)高于癌旁组织(0.9±0.7),差异有统计学意义(P<0.05), SPRY4-IT1在U87,U251细胞中表达明显升高(P<0.05)。成功构建SPRY4-IT1过表达稳转细胞株,划痕实验和Transwell实验证实SPRY4-IT1可促进脑胶质瘤细胞迁移。但CCK-8、流式细胞技术结果显示SPRY4-IT1对细胞增殖和凋亡无明显影响。相较瘤周细胞,SPRY4-IT1在脑胶质瘤细胞中高表达,并促进脑胶质瘤细胞的迁移,对细胞增殖和凋亡无明显影响。