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葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)是危害林果病害的重要病原菌,危害严重。真菌病毒作为一类重要的生防因子,有望在该类病害病菌中发现和应用。本研究以19个B.dothidea菌株为出发菌株,通过对其中13个菌株真菌病毒的提取、分离、鉴定及功能分析,明确B.dothidea真菌病毒的分类地位及功能,为明确B.dothidea真菌病毒的系统演化及生物防控新的思路提供依据,主要研究结果如下:筛选出了dsRNA病毒高效的分离方法以sdau11-122和sdau11-64为供试菌株,选用水饱和酚作为抽提剂和真菌RNA提取酶切法进行比较,以操作的方便性和dsRNA的提取的质量两个指标为标准,筛选出真菌RNA提取酶切法是提取B.dothidea dsRNA病毒是高效的方法,该方法的提取时间缩短了一半,提取的质量好。其他sdau11-65、sdau11-71等17个菌株按此方法进行了dsRNA的提取,验证了方法的高效性且发现病毒具有多样性。明确B.dothidea部分菌株dsRNA病毒的分类地位通过全基因测序、BLAST比对,发现sdau11-122菌株的病毒的RdRp大小为1408 bp,CP基因大小为1562 bp,通过同源性对比,其与Botryosphaeria dothidea partitivirus 1的同源性达到了99%,属于双分体病毒科(Paritiviridae)双分体病毒属(Partitivirus),命名为BdPV2;sdau11-64菌株的病毒序列片段大小为5161 bp,经对比后发现其与Sphaeropsis sapinea RNA virus 1的同源性达到了99%,属于整体病毒科(Totiviridae)维多利亚病毒属(Victorivirus),将其命名为Botryosphaeria dothidea Victorivirus 2(BdVV2),这是首次在B.dothidea中发现该种真菌病毒。明确了13个真菌病毒的功能通过对13个野生菌株采用原生质体制备、结合病毒唑得到脱毒菌株,提取病毒粒子并转染获得再生菌株,通过测定野生菌株、脱毒菌株和再生菌株在菌落颜色、菌落生长特性和人工刺伤接种方法,研究结果表明:脱毒菌株sdau11-119和sdau11-65与野生及再生菌株颜色差异表现较小其他菌株颜色均有一定差异;sdau11-122、sdau11-71、sdau12-60等菌株野生、脱毒及再生菌丝生长速率无差异,致病力测定野生菌株和再生菌株病斑较大,而脱毒后的菌株病斑的较小,说明病毒对病原菌具有促生作用;sdau11-64、sdau11-119、sdau11-86、sdau11-80、sdau12-40等菌株生长速率脱毒菌株高于野生及再生菌丝,致病力测定野生菌株和再生菌株病斑较小,而脱毒后菌株病斑较大,存在弱毒现象,致病力较弱,具有重要的生防价值。