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水牛卵母细胞成熟质量差是制约水牛体外胚胎生产的因素之一。本试验通过使用PDE3抑制剂Cilostamide对水牛卵母细胞进行成熟前培养以提高其发育能力,并观察了在该培养方案下对水牛卵母细胞微管和微丝的影响。实验首先对Cilostamide的浓度进行筛选,水牛卵母细胞分别培养在含有20μM和50μM Cilostamide的IVM培养液中24h后,有效的将卵母细胞抑制在GV期阶段,但两种浓度之间差异不显著(75.56%VS74.11%,P>0.05)。因此选用20μM Cilostamide进行后续实验。水牛卵母细胞被20μM Cilostamide分别抑制6h,12h,24h后,抑制在GV期的效率有所减弱(分别为88.11%,85.93%,64.39%),其中24h组的抑制率显著低于其他两组(P<0.05),但仍能抑制减数分裂恢复。在成熟前培养6h,12h,24h后,转移到无Cilostamide的IVM培养液中继续培养24h,各组都能恢复减数分裂并达到成熟(分别为63.43%,62.83%,48.50%),24h组的成熟率显著低于其他两组(P<0.05)。微管在GV期的水牛卵母细胞中未能观察到；在前中期,微管出现并环绕在染色体周围；中期阶段,纺锤体出现；后末期,微管处于两团字染色体中间；中期Ⅱ,纺锤体再次出现,一部分微管缠绕在极体处。微丝在卵母细胞发生GVBD后,富集在染色体周围。水牛卵母细胞分别于成熟前培养6h,12h,24h,对成熟培养后的MII期卵母细胞进行观察,发现微管和微丝的分布或形态与对照组相同。因此,在该培养方案下不会影响到水牛卵母细胞的细胞骨架。对经过成熟前在含有Cilostamide培养液中培养6h成熟的水牛卵母细胞进行体外受精和胚胎培养,卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数与对照组相比差异均不显著(65.73%VS55.54%,30.71%VS22.56%,203.2VS205.5,P>0.05)。实验结果说明,PDE3抑制剂Cilostamide能可逆的抑制水牛卵母细胞减数分裂的恢复,并对水牛卵母细胞的发育能力有积极的影响,且不影响成熟过程中微管和微丝的动态分布。