糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）是我国栽培范围最广、消费量最大的食用菌,子实体的形成和发育对糙皮侧耳的经济价值有着至关重要的影响。但是,目前关于糙皮侧耳子实体发育分子机制的研究还相对较少,尤其缺少子实体发育关键功能基因的研究。本实验室前期通过对糙皮侧耳原基期差异表达基因分析,获得了一个在原基期显著上调表达的转录因子编码基因fst3,并对其进行了基因克隆。本文通过蛋白序列比对分析发现,该基因的编码产物与裂褶菌子实体发育相关转录因子Fst3具有62%的一致性,由此表明本实验室克隆获得的糙皮侧耳fst3基因可能与裂褶菌fst3基因具相似的功能,即参与子实体的形成。为了明确fst3基因在糙皮侧耳子实体发育中的作用机制,本文分别对fst3基因进行了过量表达和反义沉默,并比较分析了野生型菌株、fst3基因过量表达菌株（fst3⁺菌株）和fst3基因反义沉默菌株（fst3^-菌株）在分子生物学和栽培生物学方面的差异。本文主要研究结论如下:1.通过对糙皮侧耳Fst3蛋白进行序列比对分析,发现该蛋白与已经报道的裂褶菌Fst3蛋白分别具有62%的序列一致性和71%的序列相似性,由此表明糙皮侧耳fst3基因可能与裂褶菌fst3基因具有相似的功能。2.利用本实验室构建的糙皮侧耳双元载体pPo-GPD,分别构建了fst3基因的过量表达载体pPo-GPD-fst3⁺和反义沉默载体pPo-GPD-fst3^-。3.利用农杆菌介导的遗传转化法,分别将pPo-GPD-fst3⁺载体和pPo-GPD-fst3^-载体转化糙皮侧耳菌丝块或原生质体。通过潮霉素抗性筛选获得了若干个拟转化子,并进一步对部分拟转化子进行了hyg基因、P_gpd-hyg基因、P_gpd-fst3⁺基因、P_gpd-fst3^-基因PCR筛选和验证,最终获得16个fst3⁺菌株和11个fst3^-菌株。4.通过RT-qPCR,分别对fst3⁺菌株和fst3^-菌株中的fst3基因进行了mRNA表达量检测。结果显示:与野生型菌株相比,fst3⁺菌株中的fst3基因上调表达1.26⁹.59倍,fst3^-菌株中的fst3基因表达量下调0.01⁰.30倍。本部分实验结果充分证明本文成功获得了fst3基因的过量表达菌株和反义沉默菌株。5.通过平板栽培试验和袋栽试验,对得到的fst3⁺菌株和fst3^-菌株进行了栽培生物学分析。平板栽培实验结果显示:fst3⁺菌株形成的原基数量和子实体大小均与野生型菌株一致（原基数较少,子实体较大）;fst3^-菌株形成的原基数量多于野生型菌株,但子实体较小。袋栽实验结果显示:与野生型菌株相似,fst3⁺菌株形成的原基数量较少,且原基分化不一;fst3^-菌株形成的原基数量显著多于野生型菌株,且原基分化均匀、子实体均较小。