Ctla4-Ig和Ido基因在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用

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实验目的采用改进咔曼哒“双套管法”将Wistar大鼠肝脏移至SD大鼠体内,通过质粒将合并基因Ctla4-Ig-Ido准确地导入到SD大鼠,检测相应炎症指标和观察T细胞凋亡情况,探索在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用。实验方法Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体;第一组导入组合基因Ctla4-Ig-Ido,第二组导入Ctla4-Ig基因,第三组导入Ido基因,第四组导入不含基因的空白质粒;手术后一周,每组处死3只大鼠,收集下腔静脉血,检测ALT、AST、TBiL、TNF-α、IL-2、T淋巴细胞凋亡情况和大鼠肝脏病理变化。实验结果预实验组完成手术训练,熟练掌握手术操作步骤。实验组空白组大鼠术后炎症指标升高明显,病理变化显著、未见凋亡细胞、RAI评分最高,14天内无1例大鼠存活;第一组大鼠术后炎症指标升高不明显,病理变化不显著、出现凋亡细胞、RAI评分最低。实验结论在大鼠中准确引入感兴趣的Ctla4-Ig-Ido基因可以减少各种炎症标志物的产生,减轻肝脏病理反应,延长大鼠术后的存活时间,因此,我们得出结论,导入合并基因Ctla4-Ig-Ido可以使受体SD大鼠减轻免疫排斥反应。
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