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低密度脂蛋白受体LDLR(Low density lipoprotein receptor)对调节胆固醇的内环境稳定起重要作用，各种原因引起的LDLR功能降低或缺失都会引起胆固醇代谢的紊乱，血浆胆固醇水平升高加速了动脉粥样硬化斑的形成，进而诱发心脏疾病，因此该受体可能成为抗动脉粥样硬化药物筛选的靶位。本文在甲醇酵母体系中表达了人低密度脂蛋白受体配基结合结构域(sLDLR)，并建立了LDLR拮抗剂筛选模型。 应用RT-PCR方法，以人肝癌Bel-7402总RNA为模板扩增了编码人sLDLR的基因片段，核苷酸序列分析表明与报道的LDLR cDNA序列相比只有一个同义突变。将目的基因插入甲醇酵母表达质粒pPIC9K的α-因子信号肽编码基因序列下游，将其线性化后用电穿孔法导入甲醇酵母(Pichia pastoris GS115)。 对His~+转化子，利用Mut~S表型在MM培养基生长缓慢的特性，筛选获得Mut~S表型的重组子，经PCR鉴定表型正确后，采用MMC培养基进行诱导表达，对终浓度1％甲醇诱导5天的发酵上清液行SDS-PAGE分析，获得一株表达分子量37 kD特异蛋白带的菌株，Western blot分析证实表达蛋白为sLDLR；配基结合实验(LIGAND BINDING blot)结果表明，表达的sLDLR具有结合LDL的生物学活性。此外对Mut~S转化子的诱导条件进行了初步优化。 采用双膜原位法筛选到了表达sLDLR的Mut~+表型转化子，利用该转