农抗9512-2的分离分析及生物理化特性的研究

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杀虫抗生素9512-2是由吸水链霉菌9512-2菌株产生的具有杀虫及抑菌活性的抗生素。实验表明,杀虫抑菌活性物质主要存在于菌丝体中。 通过对农抗9512-2的生物活性,薄层层析以及高效液相色谱分离实验等的初步研究,确立了分离提纯农抗9512-2的路线。菌丝体用1:1(v/v)的正丁醇和乙酸乙酯的混合溶剂浸提,浸提液浓缩,然后用石油醚溶解浓缩物,离心弃去沉淀后再浓缩,浓缩物直接薄层层析得到9512-2的精制品,精制品最后用高效液相色谱分离得到农抗9512-2的三种单组分。 官能团实验表明,组分1和组分2对α-萘酚和碱性酒石酸酮试验反应成阳性,对其他实验反应成阴性,说明组分1和组分2中有还原糖基;组分3对所有官能团实验都成阴性反应。 由三种单组分的紫外吸收光谱可知,9512-2组分1的UVmax=247nm,组分2的UVmax=247nm,组分3的UVmax=228nm。 初步质谱分析结果表明,组分1的分子量为1254.8;组分2的分子量为1218.8;组分3的分子量为790.6。 对9512-2的三种单组分进行了化学定量分析方法的研究,结果表明用高效液相色谱法分析时,组分1的相关系数、变异系数和回收率分别为0.99982、0.0150、93.85-107.27%;组分2的相关系数、变异系数和回收率分别为0.99941、0.00356、95.42-101.20%;组分3的相关系数、变异系数和回收率分别为0.99960、0.00878、99.34-104.60%。 经过杀虫活性实验,证明9512-2组分1对桃蚜、萝卜蚜、小菜蛾以及斜纹夜蛾有较好的杀虫活性,9512-2的组分2对桃蚜、萝卜蚜以及斜纹夜蛾也有一定的杀虫活性,但是杀虫效果不如组分1好;组分3没有杀虫活性。抑菌实验表明组分1、组分2无抑菌活性,而组分3对绝大多数供试病原真菌有抑菌作用。实验结果表明,9512-2组分1对桃蚜的LC50为80.78μg/ml,对萝卜蚜的LC50为4.41μg/ml,对小菜蛾的LC50为81.70μg/ml,对斜纹夜蛾的LC50为115.31μg/ml;9512-2组分2对桃蚜的LC50为263.65μg/ml,对萝卜蚜的LC50为120.65μg/ml,对斜纹夜蛾的LC50为195.41μg/ml。
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