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研究采用国内分布最为广泛的羊肚菌(Morchella esculenta(L.) Pers.5.69)和高羊肚菌(Morchella elata(L.)5.29)为材料,比较两种羊肚菌多糖在含量和药理活性上的区别。实验提取了两类羊肚菌的胞外多糖MEPA和MEPB,分别对其纯化获得四种多糖纯品:MEP1、MEP2、MEP3、MEP4,对MEP1和MEP2的性质进行了分析,MEP1总糖含量为86％,蛋白含量为8.5％;MEP2总糖含量为94％;蛋白含量为3.1％。MEP1红外光谱分析含α型糖苷键及吡喃糖环吸收峰;MEP2红外光谱分析有吡喃糖环的醚键C=O=C伸缩振动峰及α-糖苷键的伸缩振动峰。MEP1键型为1→3键38.2％,1→6连接7.2％,1→2/1→4键54.6％;MEP2键型为1→3键16.4％,1→6连接2.4％,1→2/1→4键81.2％。MEP1的相对分子量为2.48×106，MEP2的相对分子量为1.94×104。MEP1单糖组成为木糖,甘露糖和葡萄糖,其摩尔比为17.1:32.4:43.3;MEP2单糖组成为阿拉伯糖,葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为32.5:71.1:7.9。 体内实验表明羊肚菌多糖有较高的免疫活性,可提升小鼠胸腺指数及脾指数,提高血清溶菌酶含量、巨噬细胞吞噬率及吞噬指数。另取MEP2对Cy诱导的免疫低下鼠进行实验,发现其同样可提升胸腺指数及脾指数,增加廓清指数及吞噬指数,同时增加血清溶血形成及外周血T淋巴细胞比率。综合羊肚菌多糖对正常小鼠和Cy诱导的免疫低下鼠的研究表明,羊肚菌胞外多糖有良好的免疫活性,且主要表现在对细胞免疫的增强和对非特异性免疫的促进这两个方面。体外实验采用MTT法检测羊肚菌多糖对脾淋巴细胞的毒性结果表明,两类羊肚菌多糖MEPA及MEPB在10～200μg/mL范围内,对脾淋巴细胞没有直接细胞毒性。对脾脏细胞多糖的MTT实验表明,两类羊肚菌多糖MEPA及MEPB对B淋巴细胞均无明显促进作用,而对纯化的淋巴细胞和T淋巴细胞均有非常明显的增殖促进作用,且该作用在浓度为50μg/mL时最为显著。在动物体内,T淋巴细胞主要参与细胞免疫,而B淋巴细胞主要作用在于体液免疫,以上的实验结果表明MEP在体外有较为明显的细胞免疫活性。同时羊肚菌多糖MEPA及MEPB能明显促进巨噬细胞NO的释放量,该作用在浓度为30μg/mL时最为明显。 体外MTT实验表明羊肚菌多糖MEPA及MEPB均可于体外直接杀死Hep2肿瘤细胞。采用MEP1组分进行实验发现其在体外可以诱导肿瘤细胞Hep2凋亡,且该效应随着多糖浓度的增加而增加。在抑制Hep2细胞迁移方面,MEP1也表现出良好的活性,并可以提高细胞内钙离子浓度,从而诱导细胞凋亡。在对MEP1对巨噬细胞作用检测中,也表现出增高细胞内钙离子浓度的效应。 综合体内外实验结论,羊肚菌多糖MEPA及MEPB均有良好的免疫促进作用及抑瘤作用,有非常好的临床应用前景。