目的:　　 通过基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和双向电泳(2-DE)技术比较类风湿关节炎(RA)患者、骨性关节炎(OA)患者以及健康体检者的血清蛋白表达谱，筛选、分析差异蛋白，寻找RA的血清蛋白标志物，为此病的发病机制提供线索，为早期诊断、寻找治疗的靶标提供依据。　　 方法:　　 将131例患者和健康体检者血清标本随机地分为建模组（30例RA，20例OA及21名健康体检者）和试验组（30例RA，15例OA及15名健康体检者）。采用弱阳离子(WCX)纳米磁性微球捕获收集血清中的相关蛋白质，所获蛋白质经PBSⅡ-C蛋白质芯片阅读仪绘制蛋白指纹图谱，这些图谱经Proteinchip和BiomarkerWizard分析之后，用BiomarkerPatternsSoftware进行识别，最终筛选出RA的特异性蛋白标志物，并优化组合建立诊断模型。用建立的蛋白质谱模型对试验组血清标本进行盲法预测，验证该模型。用2-DE技术对10例RA患者和10名健康体检者的血清蛋白质进行分离，电泳凝胶经硝酸银染色后，通过图像扫描和初步分析筛选特异蛋白质斑点，从中选取目的蛋白质斑点，用MALDI-TOF-MS测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱。　　 结果:　　 (1)RA组和对照组之间的血清蛋白质指纹图谱分析　　 用MALDI-TOF-MS技术结合WCX纳米磁性微球，对建模组的30例RA患者和41例对照者（20例OA患者和21名健康体检者）的血清样本进行蛋白指纹图谱分析，在质荷比(m/z)为2000～20000内共发现33个具有显著性差异的蛋白峰。与对照组相比，RA患者血清中高表达的蛋白峰有13个，低表达的有20个。　　 (2)RA患者血清蛋白标志物的筛选及诊断模型的建立　　 在33个差异蛋白峰中筛选出5个诊断RA的最佳血清蛋白标志物(m/z分别为15715.5、7771.4、8959.4、8469.8和8710.8)，并建立诊断模型，敏感性为93.3％，特异性为95.1％。在试验组中进行双盲实验验证，该模型对RA诊断的敏感性为86.7％，特异性为90％。　　 (3)RA患者与健康体检者的血清差异蛋白斑点的获取及鉴定　　 在实验对象的血清2-DE图谱中约检测到278个蛋白质斑点，经扫描分析发现有15个蛋白质斑点在RA患者与健康体检者的血清之间有显著差异表达，从中选取清晰的、表达水平改变明显的8个蛋白质斑点进行胶内原位酶解，这8个蛋白质经质谱分析全部鉴定出来。　　 结论:　　 通过MALDI-TOF-MS结合WCX纳米磁性微球技术成功地构建了RA诊断模型，该模型由m/z分别为15715.5、7771.4、8959.4、8469.8和8710.8的5个蛋白质组成，盲法检测进一步证实该模型临床诊断的高灵敏度和高特异性。这些蛋白可能参与RA的发病机制，对RA的早期诊断、早期治疗等方面具有一定的价值。　　 采用2-DE联合质谱分析技术成功地筛选出8个RA相关蛋白，这些蛋白有望成为RA患者的诊疗蛋白标志物，可为RA的诊断、临床疗效的观察和临床治疗的指导提供参考指标，也为其他自身免疫性疾病血清相关蛋白的筛选提供一个可行的方法。