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目的血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor-C VEGF-C）通过对肿瘤间质新生淋巴管内皮细胞的增殖和迁移的调控,促进肿瘤的淋巴管形成。本研究应用经过化学修饰的小干扰RNA（smallinterference RNA,siRNA）在体内外抑制VEGF-C的表达,探讨化学修饰的siRNA介导的RNA干扰技术对乳腺癌基因治疗的可行性和特异性。方法设计针对VEGF-C基因的小干扰RNA,选用阳离子脂质体jetPEITM 2000作为转染试剂。在体外实验中,以脂质体转染法将双链siRNA导入人乳腺癌细胞株MCF-7细胞,设立空白对照组（转染试剂中只加无血清无抗生素培养基）、脂质体组(转染试剂中只加jetPEITM 2000 0.5μl/孔)、3个siRNA浓度梯度组（50、100、200 nmol/L）及siRNA SCR组（100 nmol/L）,用四甲基偶氮唑蓝（MTT比色法）检测siRNA对MCF-7细胞增殖的影响。通过Hoechst33258染色观察MCF-7细胞的凋亡,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染前后VEGF-C基因和p53基因的mRNA表达水平,蛋白印记试验（Western blot）检测VEGF-C基因和p53基因的蛋白水平表达变化;在体内实验中,于雌裸鼠皮下种植MCF-7细胞制备动物模型,将成瘤阳性的裸小鼠随机分为VEGF-C siRNA处理组、脂质体组和对照组,每组5只。VEGF-C siRNA处理组肿瘤局部注射VEGF-C siRNA 1 mg/kg与jetPEITM混合物,脂质体组肿瘤局部注射jetPEITM 2000（浓度与上述处理组相同）和PBS,对照组仅注射PBS。每3d注射1次,连续8次。22d后拉颈处死全部动物,取肿瘤,采用半定量RT-PCR分析VEGF mRNA水平,Western blotting检测VEGF-C蛋白表达水平。结果体外实验结果显示:VEGF-C siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后,VEGF-C siRNA三个浓度组细胞增长明显减慢,细胞生长抑制率分别达26.12%、50.01%、52.21%,VEGF-C siRNA终浓度为100nmol/L时达最佳抑制效果（50.01%）。Hoechst 33258荧光染色显示转染siRNA 72h后细胞内可见凋亡小体,RT-PCR实验结果显示:与正常对照组比较,VEGF-C siRNA处理组明显下调了VEGF-C基因与p53基因mRNA的表达（P＜0.01）。Western blot检测显示:与正常对照组比较,VEGF-C siRNA处理组蛋白VEGF-C和p53的表达显著下调（P＜0.01）。空白对照组、脂质体组和siRNA SCR组各指标无显著变化。体内实验结果显示:siRNA治疗组裸鼠生长状态良好,体重稳定,瘤组织的增长受到明显抑制,RT-PCR及Western blot均显示VEGF-C基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,对照组各指标无显著变化。结论化学修饰的siRNA介导的RNAi在体内外均能成功下调靶基因VEGF-C的表达,抑制MCF-7细胞增殖,可能是一种潜在的肿瘤基因治疗新方法。同时本研究显示,乳腺癌中p53与VEGF-C表达有关,提示突变型p53可能参与VEGF-C表达的调控,从而参与乳腺癌的血管生成调节。