携带IL-24及IFN-β双基因的溶瘤腺病毒靶向治疗癌症的研究

来源 :浙江理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wusuowei2100
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着不断的探索,精准医学与个体化治疗逐步被大众承认。2001年,中国科学院刘新垣院士提出癌症靶向基因-病毒治疗策略(Cancer Targeting Gene-Viro Therapy,CTGVT)。这是一种将基因治疗与病毒治疗两种方法合二为一的全新的治疗方法,通过在病毒上插入治疗基因,靶向的进入肿瘤。经过病毒的复制,使得携带的基因的扩增。最终达到抑制肿瘤生长的作用。在本实验研究中,我们采用CTGVT策略,通过向载体的多克隆位点(TK区)插入外源基因从而增强溶瘤腺病毒对于癌细胞的杀伤效果。病毒靶向到肿瘤细胞并在其中大量复制的同时携带的治疗基因IL-24与IFN-β也随之大量的复制,从而大大提高了抗癌效果。并且运用腺病毒复制特异性Survivin启动子(sp)的优势,同时将E1B区的55bp(Δ55)碱基删除,从而构建溶瘤腺病毒Onco Ad-surp-E1A-E1B(Δ55)。通过重组技术,将IL-24与IFN-β添加于溶瘤腺病毒OncoAd-surp-E1A-E1B(Δ55)载体中,得到新型重组双基因靶向溶瘤腺病毒OncoAd-(IL-24)-surp-E1A-E1B(Δ55)-(IFN-β)。同时我们还利用新型腺病毒构建系统。分别构建了空载病毒OncoAd-surp-E1A-E1B(Δ55),以及单基因病毒Onco Ad-(IL-24)-surp-E1A-E1B(Δ55)和OncoAd-surp-E1A-E1B(Δ55)-(IFN-β)作为对照,鉴定成功后,通过氯化铯梯度离心等纯化工艺得到滴度符合的实验样品,经过四种病毒以及无病毒对照组之间细胞实验的比较。将不同浓度梯度的病毒加于肿瘤以及正常细胞中,通过荧光显微镜、MTT检测、结晶紫染色;Hochest33342染色、流式细胞术和Western blot分别检测OncoAd-(IL-24)-surp-E1A-E1B(Δ55)-(IFN-β)对癌细胞的形态学变化、细胞存活率;凋亡小体形成。凋亡信号转导相关蛋白表达的影响。结果显示,携带目的基因的腺病毒对于肝癌细胞的靶向杀伤效果明显,通过相关实验以及大量文章的查询,我们推测携带IL-24与IFN-β的腺病毒靶向感染肝癌细胞后导致下游抑制凋亡相关的基因活化水平降低,内质网应激持续进行最终触发caspase3、PARP等的级联反应走向凋亡途径。我们的研究是探索性的研究,为腺病毒载体以及IL-24与IFN-β在基因治疗中的应用提供了一定的参考,同时也为精准医学与肿瘤个性化治疗提供了一种理论上的构思与框架。
其他文献
北京既是“都”又是“城”。据最新的消息来看,北京的功能布局和城市规划或将发生一系列变化。$$5月17日,中共北京市委十一届十四次全会在北京召开。全会研究讨论了《北京城市
报纸
结合北京地铁盾构管片施工过程中各工序的特点,对盾构管片生产工艺进行了系统分析,尤其是对管片质量影响大的工序进行研究,以期最大程度地提高管片的精度和质量。
寒冷地区冬季清除道路和公共设施的冰雪,一直是顽固难题。冰雪路面不能及时清理将给机动车辆和行人带来诸多困难,甚至会造成城市交通堵塞,运输瘫痪。现在大多数积雪道路还是
乳腺增生是妇女的常见病和多发病,中医谓之乳癖,是乳腺组织导管和乳小叶在结构上的退行性病变及进行性结缔组织的生长,约占全部乳腺疾病的75%,近年来乳腺增生发病率有逐年上
地方应用型大学作为培养应用型创新人才的阵地,肩负着为地方经济社会服务的历史使命。地方应用型大学要明确应用型创新人才培养目标,尊重应用型创新人才的特性,不断探讨应用
中小企业财务管理创新是在中小企业原有财务管理制度上进行的变革,针对中小企业财务管理活动积累的财务状况,通过有效的财务管理制度来实现中小企业的财务目标,促进中小企业
精品课程建设已经有了多年发展,精品课程最大的目标就是提高教学质量,精品课程巩固和提高了教学工作在学校各项工作中的中心地位,促进了优质教学资源的数字化的建设,对于学校
住宅园林景观设计与我国社会的发展关系密切,所以,园林景观的设计要满足大众需要。住宅区的园林景观设计不仅要融入大生态当中,还要合理规划,营造出人与自然和谐发展的空间,