论文部分内容阅读
目的:评估苦参碱对喉癌TU686细胞及转染EBV后的喉癌TU686细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:采用细胞培养获取喉癌TU686细胞,选取对数期生长的喉癌TU686细胞,分别按苦参碱剂量分为第1组对照组(0 mg/ml)、第2组(0.5 mg/ml)、第3组(1 mg/ml)、第4组(2 mg/ml)和第5组(4 mg/ml),应用基于WST-8比色检测试剂盒的CCK-8法测定喉癌细胞的活力,并得到下一步实验的合适药物浓度;用EBV转染喉癌TU686细胞,RT-PCR检测EBV-DNA含量后,分为未处理组(即对照组)、苦参碱处理组(苦参碱的终浓度为1 mg/ml)、EBV处理组(EBV终浓度20%(V/V))和苦参碱+EBV处理组四组,分别采用细胞流式凋亡实验、划痕实验、Transwell小室实验方法检测苦参碱对EBV(+/-)喉癌TU686细胞凋亡、迁移和侵袭能力的影响;用RT-PCR和Western-Blot实验方法分析苦参碱对EBV(+/-)喉癌TU686细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、NF-κB p50和p65的RNA和蛋白表达水平的影响。结果:1、苦参碱能以剂量依赖性抑制喉癌TU686细胞和喉癌Hep-2细胞的增殖活力,24小时苦参碱对喉癌TU686细胞抑制率分别为47.37%、65.87%、83.48%、91.92%(P<0.05);苦参碱在低于其毒性计量的浓度下能抑制喉癌TU686细胞的迁移和侵袭的能力,并促进喉癌TU686细胞的凋亡,同时使喉癌TU686细胞中MMP-2、NF-κB p50和p65的RNA和蛋白表达量也降低,与对照组之间存在显著差异。2、苦参碱能抑制EBV转染后喉癌TU686细胞的迁移和侵袭,并促进喉癌TU686细胞的凋亡,同时抑制喉癌TU686细胞中MMP-2、NF-κB p50和p65的RNA和蛋白表达。3、EBV具有促进喉癌TU686细胞的迁移和侵袭,同时可以升高喉癌TU686细胞中的MMP-2、NF-κB p50和p65的表达水平。结论:苦参碱具有抑制喉癌TU686细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,并可以抑制转染EBV后的喉癌TU686细胞增殖、迁移和侵袭的能力,故苦参碱可能是一种潜在的用来治疗喉癌的药物。