背景和目的：幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称H.pylori)是多种上消化系统疾病如胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤、胃癌等发生的主要环境因素和致病因子。目前根除幽门螺杆菌指南推荐使用标准三联疗法：质子泵抑制剂(proton pump inhibitor, PPI)、克拉霉素(clarithromycin)z阿莫西林(amoxicillin)或甲硝唑(metronidazole)z但近年来由于H. pylori耐药菌株的增多使根除H.pylori变得更加困难,致使其疗效降低、根除率下降。因此寻找更新的抗生素疗法成为目前改进根除疗法措施中不可或缺的组成部分。目前研究表明以阿莫西林和左氧氟沙星为基础的三联方案比常规四联方案、标准三联方案具有根除率高、抗生素相关不良反应发生率低的优点,并被推荐作为一线替代方案或补救方案广泛应用。由于H.pylori特异性驻留在胃黏液层下方的胃黏膜表面,必需要有足够的抗生素分布到H.pylori驻留的胃黏膜表面,才能达到根除其所需的抗生素杀菌浓度,因此抗生素能否成功根除H.pylori在很大程度上依赖于胃局部的抗生素浓度。因而,药物胃内转运分布的研究显得至关重要。本课题拟建立胃内药物分布研究的大鼠动物模型,研究以新一代PPI雷贝拉唑为基础的抗H.pylori感染三联疗法中阿莫西林和左氧氟沙星在大鼠胃内转运、分布特点及雷贝拉唑对其药动学和胃内转运的影响；并以其为基础,进一步研究该三联疗法中阿莫西林和左氧氟沙星在人体胃内转运分布的特点,以期这种研究能为临床抗H.pylori感染的治疗方案中药物的选择和实施提供相关实验依据和实验支持,并为研究胃内药物分布提供技术平台和实验基础。方法：1)动物实验(1)建立大鼠胃内抗生素转运模型：采用Wistar雄性大鼠,腹腔麻醉后切开腹部,在十二指肠近幽门处切口,将一根橡胶软管经切口插入胃窦,灌洗胃腔后拔出软管,结扎幽门。经尾静脉给药,给药后在2小时内每隔15分钟腹主动脉取血,处死大鼠,收集胃液并测体积和pH值,游离胃,水泡法剥离胃黏膜,将各部位黏膜称重并匀浆,保存于-80度待测。(2)实验分组：对照组(生理盐水组)；阿莫西林组(阿莫西林50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg、200 mg/kg+雷贝拉唑2 mg/kg组)；左氧氟沙星组(左氧氟沙星50mg/kg、100mg/kg、100mg/kg+雷贝拉唑2 mg/kg组)。每组48只大鼠,每个时间点6只大鼠。(3)大鼠生物样品中阿莫西林、左氧氟沙星高效液相色谱检测方法的建立：采用Waters高效液相色谱系统建立阿莫西林、左氧氟沙星在大鼠血浆、胃液、胃黏膜组织中浓度的检测方法,检测各生物样品中的浓度。2)人体试验(1)临床试验：收集经14C尿素呼气试验和胃镜证实幽门螺杆菌感染的胃炎或良性消化性溃疡病例,给予雷贝拉唑(10mg bid)、阿莫西林(1g bid)、左氧氟沙星(0.5g qd)三联疗法10天,并电话和复查时询问药物不良反应,第10天口服药物后2小时(2小时组)或4小时(4小时组)行胃镜检查、活检胃黏膜并匀浆,收集胃液并测pH值,采静脉血取血浆。检测样品中抗生素浓度。治疗结束4周后行14C尿素呼气试验。(2)抗生素高效液相色谱检测方法的建立：采用Waters高效液相色谱系统建立阿莫西林、左氧氟沙星在人体血浆、胃液、胃黏膜组织中浓度的检测方法,检测各生物样品中的浓度。结果：1)阿莫西林在大鼠血浆中的半衰期大约为1h,胃液和胃黏膜中阿莫西林的浓度随着阿莫西林剂量的增加而升高；在胃液中的浓度高于胃黏膜,前胃黏膜低于腺胃,胃窦和胃体未见显著性差异；胃黏膜和胃液中阿莫西林浓度只有血浆浓度的1%至2%。阿莫西林在胃中的转运分数为0.458%至1.512%。雷贝拉唑对阿莫西林血浆药动学参数没有显著影响,但升高了胃液pH值,从2.55±0.38升到5.66±0.48,降低了胃液体积,升高了胃液中阿莫西林浓度。2)左氧氟沙星在胃液中的浓度远高于血浆中的浓度,最大为血浆浓度的8.21倍；左氧氟沙星在胃液中的转运分数为1.672%至2.653%之间；在胃窦和胃体中的浓度高于前胃中的浓度,胃窦和胃体中浓度没有显著性差异。雷贝拉唑延长了左氧氟沙星的半衰期(均数为2.719比3.645小时),增加了左氧氟沙星血浆AUC0-2h、AUC0-∞、Cmax升高了胃液pH值、降低了胃液体积,但对胃液的转运分数没有显著影响。3)在人体试验中发现,服药后2小时阿莫西林和左氧氟沙星在胃液、胃黏膜中的浓度高于血浆中的浓度。阿莫西林在胃液中4小时后的浓度为血浆中浓度的2.46倍,在胃黏膜中的浓度低于在胃液中的浓度,但均高于阿莫西林的最小抑菌浓度。左氧氟沙星在胃内的局部分布浓度为：服药后2小时胃液中为35.165μg/ml,4小时为8.441μg／ml,4小时后胃黏膜中的浓度与血浆中的浓度无显著性差异,但均高于左氧氟沙星的最小抑菌浓度。以雷贝拉唑、阿莫西林、左氧氟沙星组成的三联疗法根除率较高,不良反应少。结论：1)阿莫西林能够跨胃黏膜转运到胃中,胃部不同区域的阿莫西林浓度不同：胃液中的浓度高于胃黏膜中的浓度,胃窦和胃体黏膜中的浓度高于前胃黏膜中的浓度。增加阿莫西林剂量能够升高胃内阿莫西林浓度。2)雷贝拉唑对阿莫西林的血药动力学参数和胃黏膜中的浓度没有明显的影响。雷贝拉唑升高胃液中阿莫西林的浓度是通过降低胃液体积、升高胃液pH值实现的。3)阿莫西林经系统转运进入胃内的量比较少,但在H.pylori感染的状态下胃内阿莫西林浓度能较长时间保持在较高水平。4)左氧氟沙星能够跨胃黏膜转运到胃中,胃液和胃黏膜中的左氧氟沙星浓度高于血浆中的浓度,左氧氟沙星在胃内可能存在主动转运过程。左氧氟沙星浓度的高低依次为：胃液大于胃黏膜大于血浆,腺胃粘膜高于前胃黏膜。5)雷贝拉唑能对左氧氟沙星血药动力学产生影响。6)口服左氧氟沙星后胃黏膜和胃液中左氧氟沙星浓度能较长时间保持在远高于对幽门螺杆菌的最小抑菌浓度。7)以雷贝拉唑、左氧氟沙星和阿莫西林组成的三联疗法对H.pylori感染根除率高、不良反应少,是一个可供临床选择的根除H.pylori的治疗方案。