绿豆渣ACE抑制肽的制备、鉴定及其模拟移动床色谱分离技术研究

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:csincis
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了充分利用绿豆蛋白资源,增加绿豆加工产品附加值,本课题以绿豆淀粉加工副产物绿豆渣为实验原料,经预处理后采用酶解技术制备绿豆渣ACE(Angiotensin ConvertingEnzyme)抑制肽,并利用分离纯化技术和生物质谱技术对降血压肽进行了纯化和鉴定,最后通过模拟移动床色谱技术进行产业化分离高活性降血压肽。主要研究内容和结论如下。(1)通过超微粉碎、有机溶剂萃取、酶解等处理技术,打破原料致密的结构,去除其中的淀粉、脂类等可能影响到肽的制备与纯化的物质。在酶的筛选试验中,以酶解产物ACE抑制率和水解度为指标选出最佳水解用酶为Alcalase2.4L碱性蛋白酶。(2)选择底物浓度、pH、温度和加酶量[E]:[S]为单因素,并且确定4种因素的参数值进行正交试验,以ACE抑制率为评价指标,确定酶法水解制备绿豆渣ACE抑制肽的最优工艺条件。研究结果表明,pH8.0,温度50℃,底物浓度9%,加酶量[E]:[S]1.5:100,可得到最大ACE抑制率为75.68%。(3)产物纯化过程首先分别采用截留分子质量5000u、3000u和1000u超滤膜进行分级分离,得到分子量1000-3000u之间的组分进行大孔树脂分离,得到肽的ACE抑制率80.5%。树脂分离产物再经制备型RP-HPLC(反相高效液相色潽)分离,得到ACE抑制率为89.5%的高活性ACE抑制肽。对RP-HPLC分离高活性产物进行序列测定,串联质谱联用测定结果经搜库显示有三个肽序列匹配率最高,序列分别为:FLVNPDDNENL、FLVNPDDNENLRII、KDNVISEIPTEVLDL。(4)根据肽纯度、收率两个角度分析的试验结果,模拟移动床的数据模型和相关理论结合单因素试验,确定进样浓度为14mg/mL,进样流速、水洗1流速、醇洗流速、水洗2流速的值分别定为:14.0mL/min,21.0mL/min,12.0mL/min,26.0mL/min为最佳。利用人工胃液、人工肠液进行体外模拟试验,试验结果表明,高活性绿豆渣ACE抑制肽能够耐受人工胃液、人工肠液的作用,有较强的稳定性并且其降血压功能较好。
其他文献
<正>在数字化时代,汉字书写的环境发生了诸多变化。一方面,技术的进步让人们更容易亲近历代书法范本;另一方面,键盘也在逐渐蚕食书写。为应对数字化时代书法教育所面临的诸多
<正>"要大胆闯、大胆试、自主改,尽快形成一批可复制、可推广的新制度,加快在促进投资贸易便利、监管高效便捷、法制环境规范等方面先试出首批管用、有效的成果。"习近平总书
当前,各类社会矛盾日益凸显,认真研究社会矛盾纠纷排查化解工作存在的问题及开展此项工作的基本原则和具体的方法思路具有着重要的理论意义,对于有效排查化解社会矛盾,促进社
作为一种传统乐器,二胡与其他乐器一样,主要是通过技术与情感的融合来展现审美情感,因此,想要保证二胡演奏的效果,娴熟的演奏技术和真切的情感意境必不可少。本文就二胡演奏
<正>一、德国能源转型及主要目标2011年福岛核事故后,德国政府作出全面退出核能的决定,实施以可再生能源为主的国家能源利用结构的全面转型。这标志着"能源转型"正式被确立为
目的探讨利用低成本开源软件基于多模态神经影像的虚拟现实技术对三叉神经痛和面肌痉挛患者后颅窝神经血管压迫进行术前模拟与评估的技术可行性及准确性。方法纳入于我院神经
刑事和解作为目前刑事理论界与实务界关注的共同热点,其研究已呈如火如荼之式。然而,地处边远、经济落后、资源匮乏、传统民俗习惯深远的农村民族地区,由于受到历史传统的影
<正>说来惭愧,作为一名声乐教育者,虽早知作曲家、教育家陈田鹤(1911—1955)先生的大名,此前却从未演唱过先生的声乐作品,并不是说其作品缺乏价值和艺术性,而是缘于中国高等
金融消费者保护成为我国金融市场中一个应该关注的问题。美国金融危机后的金融监管改革将金融消费者保护提到前所未有的高度,其对金融消费者保护的改革措施值得我国借鉴。我
对犯罪实体的认识不能仅停留在"客观"与"主观"两个概念上;犯罪论体系应当以价值或目的作为出发点,从而体现评价;以违法与责任为支柱构建犯罪论体系,具有充分根据与内在合理性