【摘 要】
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本文以铁皮石斛为原材料,采取水提醇沉法提取其活性成分铁皮石斛多糖,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究了铁皮石斛多糖对线虫的寿命、耐受性和健康寿命的影响,利用CB1370(daf
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本文以铁皮石斛为原材料,采取水提醇沉法提取其活性成分铁皮石斛多糖,并以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究了铁皮石斛多糖对线虫的寿命、耐受性和健康寿命的影响,利用CB1370(daf-2(e1370)Ⅲ)、CF1038(daf-16(mu86)Ⅰ)、TJ365(DAF-16::GFP)线虫品系探讨了铁皮石斛多糖延长寿命可能的作用机制。结果表明铁皮石斛多糖的得率为17.66%,粗多糖中多糖含量为91.35%；与对照组相比,铁皮石斛多糖可以使线虫寿命得到显著延长,并且显著提高了了线虫的耐受性,其中以热应激能力增强效果最为显著,同时也可以延长线虫在热胁迫和氧化损伤条件下的健康寿命,初步推断铁皮石斛多糖延长线虫寿命可能是通过提高其耐受能力实现的；铁皮石斛多糖不能延长CB130、CF1038线虫品系的寿命,但可以显著延长野生型N2线虫的寿命,因此铁皮石斛多糖延长线虫寿命可能与DAF-2、DAF-16基因或胰岛素信号调控途径有关；在35℃C条件下DAF-16亚细胞定位实验中,铁皮石斛多糖可以显著提高DAF-16基因的进核转运表达能力,增强TJ365线虫的抗热胁迫能力,实验结果说明铁皮石斛多糖最终作用于胰岛素信号通路下游基因DAF-16的转运表达；实时荧光定量PCR实验中铁皮石斛多糖可以使DAF-16、HSP-16.2基因表达上调,通过提高下游基因DAF-16的表达能力增强线虫的耐受能力进而影响寿命的调控。实验结论为一定剂量的铁皮石斛多糖可以延长秀丽隐杆线虫寿命,其作用机制可能是通过胰岛素信号通路调控下游DAF-16基因完成对线虫的耐受能力的提高实现的。
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