前言 卵巢恶性肿瘤是致死率最高的女性生殖道肿瘤，其发生可能与内外环境中大量的自由基密切相关。一氧化氮(NO)是一种高度活跃的自由基，它可致DNA发生一系列变化，导致基因突变，诱导肿瘤发生。由于DNA的损伤野生型p53转化为突变型p53是p53的抑癌功能丧失的原因之一，我们通过检测卵巢恶性肿瘤组织中NO主要催化酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性以及突变型p53蛋白表达来探讨自由基及肿瘤基因在肿瘤组织中变化的意义。 材料与方法 1、材料 收集2000-2001年中国医科大学附属一院妇科病理存档标本75例，其中因手术切除正常卵巢11例，卵巢良性肿瘤15例，恶性肿瘤49例，根据FIGO分期标准将卵巢恶性肿瘤分为：早中期(Ⅰ、Ⅱ期)20例，晚期(Ⅲ、Ⅳ期)29例；高分化者12例，中低分化者37例，标本均经4％甲醛固定，石蜡包埋，制成5μm厚切片。 2、实验方法 采用免疫组织化学方法检测突变型p53、iNOS蛋白的表达情况，即用型SABC试剂盒、兔抗人p53多克隆抗体、兔抗人iNOS多克隆抗体由武汉博士德公司提供，切片脱蜡后，按SABC免疫组化试剂盒步骤进行。阴性对照用PBS代替一抗，每张切片随机选取5个视野，得出每张切片iNOS、突变型p53阳性染色细胞百分率，根据阳性染色细胞率分为3级：m（－）整个切片未见阳性染色或阳性染色细胞数＜10％；切阳性（十卜阳性染色细胞数占 10％－40％；枯）强阳性（＋十厂3 40％。统计学分析采用卡方检验及等级秩和检验。 结 果 1、免疫组织化学结果：iNOS／ l例正常卵巢组织中阳性率为18．18％，15例卵巢良性肿瘤为20．00助，49例恶性肿瘤中为61．22％；突变型自3正常卵巢为9．09％，卵巢良性肿瘤为 13．33％，卵巢恶性肿瘤为65．31％。经卡方检验，iNOS恶性组表达分别与正常卵巢、良性肿瘤组进行比较差异都有显著意义（P＜o．05人突变型PS 3蛋白在恶性组表达分别与正常卵巢、良性肿瘤组进行比较差异都有显著意义对＜0．01人 2．早中期及晚期卵巢恶性肿瘤中iNOS阳性表达率为50．00％在8．97啪，差别无显著性（P＞o．05入中3阳性表达率为45．00％＊9．31用，差另有显著意义（P＜o．05）。 3．卵巢恶性肿瘤高分化及中低分化组中iNOS阳性事分别为25．00闯J72．97阮，差另有显著意义（P＜0．05）；昨3为16．67％。幻．08％，差别有显著意义P＜00U。 4．卵巢恶性肿瘤中p53、iOS均为阳性表达者为28例，均为阴性者为15例，iNOS阳性P53为阴性及iNOS阴性P53为阳性者合计6例，符合率为87．76％，经统计分析二者呈正相关u＜0．of）。 讨 论 NO在体内由NOS催化产生，iNOS是NOS的一种，是机体在 ·2·异物人侵或肿瘤发生时，经该过程产生的细胞因子诱导产生的，它继而催化体内NO的生成。有人认为NO的大量产生将耗竭正常细胞生长所需的能量，并削弱细胞对各种有害刺激的防御能力。同时，大量NO作为基因的攻击物，使细胞DNA发生损伤，致肿瘤发生及发展。对人类肿瘤中NOS含量进行的大量研究发现，NOS与肿瘤的恶性程度有关，在某些肿瘤中尤其增多：如卵巢癌早腺癌、星型胶质细胞瘤等，但这些研究未对NOS进行分型，未能说明iNOS在肿瘤组织中的表达情况，而就iNOS的产生机制及催化功能来说，它在肿瘤组织中的表达应该是特异性增高的。本研究中利用免疫组化法检测到iNOS在卵巢恶性肿瘤组织中表达上调，且随肿瘤恶性程度增高而表达增高，揭示iNOS与卵巢肿瘤的发生有密切关系。 本研究还检测了现今肿瘤研究中热点的p53抑癌基因突变情况，考查iNOS的表达与p53突变之间的相关关系，结果显示二者表达符合率为87．76％，呈明确正相关，表明肿瘤发生过程中可能存在iNOS表达增加与p53突变之间的相互作用关系。 结 论 本实验得出以下结论： 1．iNOS及p53在正常卵巢k巢良性及恶性肿瘤中的表达呈递增趋势，二者均与卵巢肿瘤的恶性程度呈正相关。 2．iNOS昨3之间在卵巢恶性肿瘤中的表达有明确的正相关性，肿瘤发生过程中可能存在 iNOS表达增加与 p53突变之间的相互作用关系。