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目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体( tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的成员,它可以选择性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常组织细胞无明显的毒副作用,在肿瘤治疗方面有着良好的前景和潜在的应用价值。但一些肿瘤对TRAIL并不敏感,因而目前的研究倾向于TRAIL与放化疗联合应用。本实验以体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63为模型,观察TRAIL对MG-63细胞抑制增殖、诱导凋亡的效应,判断TRAIL与临床上常用的化疗药阿霉素联合应用是否具有协同作用,并初步分析其可能的作用机制,以期为骨肉瘤的治疗提供新的策略。方法:将MG-63细胞用含10%小牛血清的DMEM(含非必需氨基酸)培养基置于37℃、5%CO2孵箱内常规培养。取对数生长期的细胞,采用MTT比色法分析TRAIL与阿霉素单独作用和联合作用时骨肉瘤MG-63细胞的抑制率及存活率;利用倒置相差显微镜观察细胞凋亡的形态变化;用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;半定量RT-PCR方法检测DR4、DR5、Caspase-8和Bcl-2 mRNA基因表达变化;实验数据用SPSS13.0软件分析。结果:MTT和FCM结果表明TRAIL和阿霉素对骨肉瘤MG-63细胞的活性均有抑制作用,二者合用可以协同抑制细胞活性和诱导凋亡。倒置相差显微镜观察,TRAIL组作用24小时后部分细胞变小,变圆,而联合用药组还可见细胞胞膜弯曲,胞质浓缩,及细胞破裂死亡的碎片。半定量RT-PCR结果显示:联合应用组DR4、DR5和caspase-8的mRNA的表达增加,与TRAIL单用组具有显著差别(P<0.05);Bcl-2的mRNA表达量无明显变化(P>0.05)。结论:1、TRAIL可以通过凋亡的方式抑制体外培养的骨肉瘤细胞株MG-63增殖,并存在着一定的剂量依赖关系。2、TRAIL与ADM联合应用对诱导MG-63细胞凋亡具有协同作用。3、TRAIL与ADM联合应用诱导MG-63细胞凋亡的机制可能与上调DR4、DR5和caspase-8的mRNA表达有关。