番茄是我国农业生产中重要的经济作物,但其在生长过程中经常遭受各种不利环境的威胁,给农业生产造成重大经济损失。随着生物技术的发展,通过基因工程手段提高植物的抗逆性已成为十分可行的方法,而此技术的关键在于对抗逆基因的挖掘与研究。本研究首次从番茄中克隆得到SlR1-A-like基因,成功构建了过表达载体,并获得转基因本氏烟草植株,对转基因植株在冷胁迫及致病疫霉侵染过程中所发挥的作用进行探究,具体研究结果如下:(1)生物信息学分析表明,SlR1-A-like基因全长1701 bp,编码566个氨基酸,所形成的SlR1-A-like蛋白为亲水性、非跨膜蛋白,该蛋白具有NB-ARC功能结构域,蛋白分子量为65.7kDa,等电点为5.69。(2)组织表达分析结果表明,SlR1-A-like基因在番茄叶片中表达量最高。非生物胁迫及激素诱导下SlR1-A-like基因表达模式分析结果表明,该基因在不同处理下均有一定程度的表达响应,以冷胁迫和SA处理后SlR1-A-like基因表达上调效果最明显。亚细胞定位结果表明,SlR1-A-like蛋白定位在细胞核与细胞质。(3)对转基因和野生型本氏烟草进行冷胁迫处理,结果表明,转基因本氏烟草的萎蔫程度比野生型本氏烟草更严重。对相关指标的测定显示,冷胁迫处理后,与野生型本氏烟草相比,转基因本氏烟草中脯氨酸和可溶性糖等渗透调节物质的含量更少;转基因本氏烟草的电解质外渗及MDA含量显著高于野生型本氏烟草,证明转基因本氏烟草膜系统的损伤更严重;对光合作用相关指标的测定结果显示,转基因本氏烟草的光合作用能力在冷胁迫后显著降低;在基因水平上,转基因本氏烟草中抗氧化酶基因的表达水平较低,抗氧化酶活性较弱,导致其积累了更多的活性氧。同时,转基因本氏烟草中抗冷相关基因的表达量也要明显低于野生型本氏烟草。(4)对转基因和野生型本氏烟草离体叶片接种致病疫霉,结果显示,转基因本氏烟草的感病程度比野生型本氏烟草更轻。根据统计分析结果,转基因本氏烟草的疾病指数和病斑直径要显著低于野生型本氏烟草,证明转基因本氏烟草对致病疫霉的抗性更强。活性氧的染色结果表明,与野生型本氏烟草相比,转基因本氏烟草中活性氧的含量更低。在基因水平上,转基因本氏烟草中抗氧化酶基因的表达水平较高,因而抗氧化酶活性较强,能够及时清除植物体内多余的活性氧,保护植物细胞免受损伤。同时,转基因本氏烟草中病程相关基因的表达量也要明显高于野生型本氏烟草。(5)利用病毒沉默载体,成功在番茄Heinz 1706植株中沉默了SlR1-A-like基因。对沉默后的番茄植株进行了相应的冷胁迫及致病疫霉侵染实验,初步结果显示,沉默植株表现出对冷胁迫的抗性及对致病疫霉的易感性。