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目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)是在慢性乙型肝炎基础上发生的严重肝功能损害,出现以黄疸、肝性脑病和腹水等为主要表现的临床综合征,其发病急,病情凶险,病死率高且治疗方法有限。目前关于肝衰竭的发病机制尚不十分明确。大多数学者认为肝衰竭主要是由免疫损伤、缺血缺氧、内毒素血症三重致死性打击的结果。肝衰竭时,肝脏功能发生严重障碍,肝脏本身合成、解毒、排泄和生物转化等发生严重障碍。维生素D是固醇衍生物,活性维生素D主要在肝脏合成。游离的活性维生素D进入细胞后能迅速与维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)结合,发挥其生物活性。维生素D主要参与钙磷代谢,近年研究发现维生素D影响细胞的增殖与分化,具有免疫调节、抗炎、抗纤维化等作用,因此发挥抑制肝脏肿瘤细胞增殖、抗肝硬化等作用。但目前维生素D与HBV相关肝功能衰竭之间的关系还未阐明。本研究通过检测HBV相关ACLF、慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)血清维生素D水平,同时比较两组患者肝组织中VDR的表达,初步探讨维生素D在HBV相关ACLF中的作用。方法:收集2013年3月至2014年11月于河北医科大学第三医院住院患者,共70例,其中CHB患者29例(CHB组)、HBV相关ACLF患者21例(ACLF组)及选取同期河北医科大学第三医院健康体检者20例(健康对照组)。并收集行肝移植的ACLF患者13例、肝穿刺活检的CHB患者肝组织16例及健康供体肝组织4例。CHB和HBV相关ACLF的诊断分别符合中华医学会感染病学分会及肝病学分会联合制定的2010年版《慢性乙型肝炎防治指南》和2012年版《肝衰竭诊疗指南》中的诊断标准。分别检测个样本生化学指标、凝血功能及HBV DNA载量,酶联免疫吸附法检测血清维生素D的水平,使用荧光定量PCR检测各样本肝组织中的VDR m RNA,应用免疫组织化学的染色方法检测肝组织内VDR蛋白的表达部位,western blot检测VDR蛋白的表达。比较血清VDR水平在各组之间的差异。采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析。实验数据以均数±标准差(x±s)表示。数据分析前进行正态性及方差齐性检验。满足正态且方差齐时,采用单因素方差分析,组间比较采用Student-Newman-Keuls法。非正态或方差不齐时,采用Kruskal-Wallis H秩和检验,组间比较采用Mann-Whitney U检验。相关性分析采用Pearson直线相关分析法。P<0.01为差异有统计学意义。结果:1 ACLF组、CHB组及健康对照组人口学及实验室检查特点各组患者的性别和年龄构成比均衡可比。ACLF组患者血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平明显高于CHB组及健康对照组(P均<0.01)ACLF组患者血清白蛋白(albumin,Alb)、凝血酶原活动度(prothrombin activity,PTA)则明显低于正常对照组,ACLF组和CHB组HBV DNA载量无明显差异(P>0.05)。2 ACLF组、CHB组患者血清中25-(OH)VD3水平21例ACLF患者、29例CHB患者及20例健康对照者接受血清25-(OH)VD3水平检测。ELISA检测示:ACLF组血清VD3水平(42.27±18.43ng/ml)、CHB组(47.63±16.18ng/ml)均低于正常对照组(94.43±28.17ng/ml),且ACLF组明显低于CHB组,差异均具有统计25-(OH)VD3学意义(P<0.01)。3 ACLF组、CHB组患者肝组织中VDR蛋白表达13例ACLF患者、16例CHB患者及4例健康对照者接受肝脏VDR蛋白检测。免疫组化检测示:VDR广泛表达于肝细胞及肝脏炎症细胞。WB检测示:ACLF组VDR蛋白表达(1.336±0.115)明显高于CHB组(1.071±0.079)及正常对照组(0.830±0.112),且CHB组明显高于正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR检测示:ACLF组VDR m RNA表达(2.65±0.32)明显高于CHB组(1.20±0.39)及健康对照组(0.93±0.07),差异均具有统计学意义(P<0.01)。同时,CHB组与健康对照组的差异无统计学意义(P>0.01)。4 ACLF组、CHB组患者血清25-(OH)VD3水平与HBV DNA的相关性ACLF组患者血清VD3不足(<29ng/ml)的发生率明显高于CHB组(38.09%vs.6.8%,P<0.01)。ACLF组患者血清VD水平与HBV DNA载量(r=-0.21,P=0.32)无相关性,CHB组患者血清VD水平与HBV DNA载量具有相关性(r=0.62,P<0.01)。结论:1 CHB患者血清维生素D与HBV DNA存在相关性。2 VDR广泛表达于肝细胞及肝脏炎症细胞中。HBV相关ACLF患者VDR表达较CHB患者及健康对照组明显增多,VDR可能参与了HBV相关ACLF的发生、发展。