非小细胞肺癌血清和胸水中VEGF及endostatin的表达水平与肿瘤分期、转移的研究

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目的:Jemal等在全球癌症统计数据报告中提出,2008年男性肺癌患者的发病率和死亡率位居恶性肿瘤的首位,女性肺癌患者发病率占恶性肿瘤的第四位,死亡率为第二位。肺癌已经成为严重危害人类健康和生命的的疾病,肿瘤的形成、发展及转移是一个复杂的病生理学过程,新生血管生成在其中扮演者至至关重要的角色。近年来,随着分子生物学研究的不断深入,对于血管生成因子和抗血管生成因子的研究成为焦点。血管内皮素生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是作用最强、特异性最高的血管生成调控因子。而内皮抑素(endostatin,ES)被认为是至今最有效的内源性血管生长抑制剂之一,是1997年由Folkman实验室的O’Reilly等在鼠血管内皮细胞瘤的细胞培养液中提取的一种蛋白质。在体内的内源性血管生成抑制剂中,ES具有广泛的抗癌活性。Folkman J等研究报道ES能调节12%的人类基因组上的血管生成调节基因的表达,从而下调病理性血管的产生,可有效抑制多达60种以上的不同肿瘤。许多的临床研究显示多种恶性肿瘤患者的血清和胸水中的ES及VEGF水平随肿瘤变化出现减低或增高的改变。联合检测肺癌患者血清和胸水中VEGF及ES的表达水平与肿瘤分期、转移的研究少有报道,本研究主要是通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)联合检测健康者血清及肺癌患者血清和胸水中VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-3及ES的表达水平,通过进行分析对比,探讨健康人和肺癌患者之间,处于不同分期肺癌患者之间的上述因子的表达的变化情况;了解和分析其中的差异,探寻并揭示相关规律,为肺癌患者的辅助诊疗、分类及分期评估等提供理论参考依据,进而为寻求肿瘤治疗另辟蹊径。方法:选取未经任何抗肿瘤治疗的原发性肺癌患者32例及10名无疾病健康者作为对照组。按要求分别留取肺癌患者及健康人的血清标本,合并癌性胸水的同时留取胸水标本,通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)联合检测健康者血清及肺癌患者血清和胸水中VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-3及ES的表达水平,进行统计分析对比。数据通过SPSS13.0软件进行统计学处理,计量资料组间差异采用成组t检验,比较采用配对t检验,相关性分析使用线性回归,以P <0.05为差异具有统计学意义。结果:1肺癌患者和健康对照者血清ES表达水平分别为(402.72±27.97)ng/mL、(379.42±37.22)ng/mL;肺癌患者和健康对照者血清VEGF-A水平分别为(403.20±21.63)ng/L、(381.08±27.00)ng/L;肺癌患者和健康对照者血清VEGF-C水平分别为(490.65±66.00)ng/L、(468.21±25.55)ng/L;肺癌患者和健康对照者血清VEGFR3水平分别为(1163.52±97.25)ng/L、(934.83±77.03)ng/L。各指标相比,肺癌患者血清ES、VEGF-A、VEGFR3高于健康人,有统计学意义(P<0.05)。肺癌患者血清VEGF-C水平与健康人比较,无统计学意义(P>0.05)。2肺腺癌和肺鳞癌患者血清中ES表达水平分别为(396.78±27.78)ng/mL、(412.64±26.46)ng/mL;肺腺癌和肺鳞癌患者血清中VEGF-A水平分别为(409.77±23.15)ng/L、(392.23±13.56)ng/L;肺腺癌和肺鳞癌患者血清中VEGF-C水平分别为(493.06±68.34)ng/L、(486.63±64.64)ng/L;肺腺癌和肺鳞癌患者血清中VEGFR3水平分别为(1163.10±110.92)ng/L、(1164.21±73.49)ng/L。各指标相比,肺腺癌血清中VEGF-A高于鳞癌患者,有统计学意义(P<0.05)。肺腺癌血清中ES、VEGF-C、VEGFR3与鳞癌患者比较,无统计学意义(P>0.05)。3I期和IV期肺癌患者血清中ES表达水平分别为(398.66±12.75)ng/mL、(404.57±32.77)ng/mL;I期和IV期肺癌患者血清中VEGF-A水平分别为(402.80±16.22)ng/L、(403.38±24.04)ng/L;I期和IV期肺癌患者血清中VEGF-C水平分别为(461.14±20.14)ng/L、(504.06±75.19)ng/L;I期和IV期肺癌患者血清中VEGFR3水平分别为(1026.32±74.72)ng/L、(1165.56±111.40)ng/L。各指标相比,I期肺癌患者血清中VEGF-C、VEGFR3和IV期比较,有统计学意义(P<0.05)。I期肺癌患者血清中ES、VEGF-A和IV期比较无统计学意义(P>0.05)。4肺癌癌性胸水中和肺癌患者血清中ES表达水平分别为(416.83±45.90)ng/mL、(402.72±27.97)ng/mL;癌性胸水中和肺癌患者血清中VEGF-A水平分别为(410.43±47.12)ng/L、(403.20±21.63)ng/L;癌性胸水中和肺癌患者血清中VEGF-C水平分别为(505.21±57.89)ng/L、(490.65±66.00)ng/L;癌性胸水中和肺癌患者血清中VEGFR3水平分别为(1225.14±70.29)ng/L、(1163.52±97.25)ng/L。各数据相比,癌性胸水中VEGFR3高于肺癌血清中的表达水平,有统计学意义(P<0.05)。癌性胸水ES、VEGF-A、VEGF-C水平与肺癌血清中比较无统计学意义。(P>0.05)。5肺腺癌癌性胸水中和肺鳞癌癌性胸水中ES表达水平分别为(418.82±39.29)ng/mL、(413.24±61.10)ng/mL;肺腺癌癌性胸水中和肺鳞癌癌性胸水中VEGF-A水平分别为(422.84±34.82)ng/L、(388.09±61.80)ng/L;肺腺癌癌性胸水中和肺鳞癌癌性胸水中VEGF-C水平分别为(501.69±56.04)ng/L、(511.54±67.31)ng/L;肺腺癌癌性胸水中和肺鳞癌癌性胸水中VEGFR3水平分别为(1243.05±45.67)ng/L、(1192.92±99.34)ng/L。肺腺癌癌性胸水中VEGFR3高于肺鳞癌癌性胸水中表达水平,有统计学意义(P<0.05)。肺腺癌癌性胸水中ES、VEGF-A、VEGF-C水平与肺鳞癌癌性胸水中比较无统计学意义。(P>0.05)。6对14例肺癌合并癌性胸水患者进行血清中ES与胸水中的ES、血清中VEGF-A与胸水中的VEGF-A、血清中VEGF-C胸水中的VEGF-C、血清中VEGFR3的水平与与胸水中的VEGFR3的水平(见图5-12),采用pearson相关两两比较:由此可见,四组间的相关性不明显(见表4)。7对32例肺癌患者血清中的ES、VEGF-A、VEGF-C、VEGFR3表达水平进行两两直线相关性比较:血清中的ES与VEGFR3呈正相关(r=0.438, P=0.012);血清中的VEGF-C与VEGFR3呈正相关(r=0.446,P=0.011)。结论:1肺癌患者血清ES、VEGF-A、VEGFR3高于健康人,有统计学意义(P<0.05)。2肺腺癌血清中VEGF-A高于鳞癌患者,有统计学意义(P<0.05)。I期肺癌患者血清中VEGF-C、VEGFR3和IV期比较,有统计学意义(P<0.05)。肺癌癌性胸水中VEGFR3高于肺癌血清中的表达水平,有统计学意义(P<0.05)。
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